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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名稱 | 貨號 |
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柯拉鬆(sōng)血吸(xī)蟲PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Schistosoma curassoniPCR |
YS-P014730 |
分類：PCR檢測試劑盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避光。
有效期：一年
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般(bān)為1年，這是(shì)指在適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑(jì)一般要貯存於-20℃下，產物檢測(cè)部分(fēn)試(shì)劑則貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復凍融。
【結果(guǒ)分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在剛(gāng)好超過正常陰(yīn)性質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品的檢測(cè)結果應為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求需在一次(cì)實驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為(wéi)可疑樣本；對於(yú)可疑(yí)樣本建議復核(hé)一(yī)次，若復(fù)核結果Ct<40且有指數擴增期，則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均判定為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境汙染，試劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽性結(jié)果；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存不當或試(shì)劑(jì)配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的試(shì)劑檢測效能(néng)下降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假陰(yīn)性結果。
PCR反(fǎn)應的特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠實性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
柯(kē)拉鬆血吸(xī)蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)其中(zhōng)引物與模板的正確(què)結(jié)合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)結合及引物鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基配對原則的。聚合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引物(wù)的結(jié)合(復性)可以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫度下進行(háng)，結(jié)合的特(tè)異性(xìng)大大(dà)增加，被擴增的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能保持很高(gāo)的正(zhèng)確度。再(zài)通過選(xuǎn)擇特異(yì)性和(hé)保(bǎo)守性高(gāo)的靶基因區(qū)，其特異性程度就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量是以指數方式增加的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位(wèi))；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小檢出(chū)率(shuài)為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次性地(dì)將(jiāng)反應液加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋上(shàng)進行(háng)變性-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴增反(fǎn)應。擴增產物一般用電(diàn)泳分(fēn)析，不(bù)一定(dìng)要用(yòng)同位素，無(wú)放射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需(xū)要分(fēn)離(lí)病毒(dú)或(huò)細菌及培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴增模(mó)板。可直接用(yòng)臨(lín)床標本如(rú)血(xiě)液，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發，細胞，活PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
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