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PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品名稱(chēng) | 英文名稱 | 貨號 |
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不明(míng)血(xiě)吸蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Schistosoma incognitumPCR |
YS-P014731 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避(bì)免(miǎn)反復凍融。
運輸(shū)：低溫，避光。
有效期：一年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效期一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是指(zhǐ)在適當的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度下。核(hé)酸擴(kuò)增部分的(dí)試劑(jì)一(yī)般要貯存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測部分試劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量避免反復(fù)凍(dòng)融。
【結果分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫設定(dìng)在(zài)剛好超過正常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增曲綫的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢測結(jié)果(guǒ)應為陽(yáng)性(xìng)，有明顯的(dí)指數(shù)擴增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一次實驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否則該(gāi)次實(shí)驗視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為可疑樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可疑樣本(běn)建議(yì)復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增期，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室環境汙染，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉汙(wū)染會出(chū)現假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保存(cún)不當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不準確引起(qǐ)的試劑(jì)檢測效能下(xià)降，可能會導致(zhì)出現假陰性結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因的特(tè)異性與保(bǎo)守性(xìng)。
不明(míng)血(xiě)吸(xī)蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中引物(wù)與模板(bǎn)的(dí)正確結合是(shì)關鍵。引物與(yǔ)模板的結合及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循鹼基配對原則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫(wēn)性，使反應中模板與引物的結合(hé)(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的(dí)溫度下進行，結(jié)合(hé)的特(tè)異性大(dà)大增加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基因片段也就能保(bǎo)持(chí)很高的正(zhèng)確(què)度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特(tè)異性和保守性(xìng)高的靶基因(yīn)區，其(qí)特(tè)異性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量是以指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起始待測(cè)模板(bǎn)擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶(bǎ)細胞；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可(kě)達3個RFU(空斑形(xíng)成單位)；在細菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加好後，即(jí)在DNA擴增液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行變性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般在2～4 小時完成(chéng)擴增反應。擴(kuò)增產物(wù)一般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不(bù)一定(dìng)要用同位素(sù)，無放(fàng)射性汙(wū)染，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純度要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分離(lí)病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品及總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增模(mó)板。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標本如血液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
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