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PCR檢測(cè)試劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英文名稱 | 貨(huò)號 |
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小(xiǎo)蛇菌(jūn)屬通用PCR檢測(cè)試劑盒 |
Serpulina spp.PCR |
YS-P014742 |
分類：PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存條件：-20℃避光保存(cún)，避(bì)免反復凍(dòng)融。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一般為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在適(shì)當的儲存溫(wēn)度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑(jì)一(yī)般要貯存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在剛好超過(guò)正常陰性質控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的最高點(diǎn)。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品的檢(jiǎn)測(cè)結果應為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一(yī)次實驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則(zé)該次實驗視為(wéi)無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為可(kě)疑樣本(běn)；對於可疑樣(yàng)本建議復核一次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則判定為陽性(xìng)，否(fǒu)則判定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙染，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙染會出現(xiàn)假陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑運輸，保存(cún)不當(dāng)或試劑配(pèi)製不準確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑檢(jiǎn)測效能(néng)下降，可能會(huì)導致出現(xiàn)假陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特異性：
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因(yīn)的特異(yì)性與保(bǎo)守(shǒu)性。
小蛇(shé)菌屬(shǔ)通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模(mó)板的正確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關鍵。引物與模(mó)板的(dí)結合及引物(wù)鏈(liàn)的延伸是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與(yǔ)引(yǐn)物的結(jié)合(復性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度下進行(háng)，結(jié)合的(dí)特(tè)異性(xìng)大大增加，被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能(néng)保(bǎo)持很高(gāo)的正確度。再通過(guò)選擇(zé)特異性和保守(shǒu)性(xìng)高的靶(bǎ)基(jī)因區，其特(tè)異性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是(shì)以指數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞；在病毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地將反(fǎn)應液(yè)加好(hǎo)後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進行變(biàn)性-退火-延伸反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小時完成擴增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產物(wù)一般(bān)用(yòng)電泳分析，不一(yī)定(dìng)要用(yòng)同位(wèi)素，無放射性汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要(yào)求低
不需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增模(mó)板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床標本(běn)如血(xiě)液，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術概論。
