產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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粘質(zhì)沙雷菌PCR檢測試(shì)劑盒 |
Serratia marcescensPCR |
YS-P014744 |
分類(lèi):PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲存條(tiáo)件:-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存,避免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸:低溫,避光(guāng)。
有效期:一年
貨期(qī):現貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期一般(bān)為(wéi)1年,這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存溫度下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的(dí)試劑一般要貯存於-20℃下,產物檢測(cè)部分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復凍(dòng)融。

u 閾值(Threshold)設(shè)定:將閾(yù)值綫設定在剛(gāng)好(hǎo)超過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲綫(xiàn)的(dí)最高點(diǎn)。
2. 陽性質控品(pǐn)的檢測結果(guǒ)應為(wéi)陽性,有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī),Ct值(zhí)應小於等於(yú)35;
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一(yī)次實驗中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足,否則該(gāi)次實驗視為無效(xiào)。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數擴(kuò)增期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本為可疑樣本(běn);對於(yú)可疑樣(yàng)本建議復核一次,若(ruò)復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增期,則判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性(xìng),否則(zé)判(pàn)定為陰性;
3. 陰性:無指數(shù)擴增期(qī),Ct=40或(huò)無Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙(wū)染,試劑汙(wū)染(rǎn),樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會(huì)出現假(jiǎ)陽性結果;
2. 試(shì)劑運(yùn)輸,保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試劑配製不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能下降,可能(néng)會(huì)導致出(chū)現假陰性(xìng)結果(guǒ)。

②鹼基配對原則;
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠實性(xìng);
④靶(bǎ)基(jī)因的特(tè)異(yì)性(xìng)與保守性(xìng)。
粘(nián)質沙(shā)雷菌PCR檢測(cè)試劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的正確結合是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則的。聚合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng),使反應中模(mó)板與引物的(dí)結合(hé)(復性)可(kě)以在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度(dù)下進(jìn)行,結合(hé)的(dí)特異性(xìng)大(dà)大增加,被(bèi)擴增的(dí)靶基因片(piàn)段也就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高(gāo)的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通過(guò)選(xuǎn)擇特異(yì)性和保(bǎo)守性(xìng)高的靶(bǎ)基因區(qū),其特(tè)異(yì)性(xìng)程度就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量是(shì)以指(zhǐ)數方式增(zēng)加(jiā)的,能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo);在(zài)病毒的檢測(cè)中,PCR的(dí)靈(líng)敏度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位(wèi));在細菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn),快速
PCR反應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地(dì)將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好後,即(jí)在DNA擴(kuò)增液和(hé)水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行變(biàn)性-退(tuì)火-延伸(shēn)反應(yīng),一般(bān)在2~4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴增反應。擴增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析,不(bù)一定要用(yòng)同位素,無放射性汙(wū)染,易推(tuī)廣。
(4) 對標本(běn)的純度(dù)要求低(dī)
不需要(yào)分離(lí)病毒(dú)或(huò)細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血(xiě)液,體(tǐ)腔液,洗(xǐ)嗽液(yè),毛發,細胞(bāo),活(huó)PCR技術概論(lùn)。
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