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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號 |
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無(wú)乳鏈球菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒 |
Streptococcus agalactiaePCR |
YS-P014781 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期一般(bān)為(wéi)1年，這是指在適當的儲(chǔ)存溫度下。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的(dí)試劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測部分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反復凍融(róng)。
【結果分(fēn)析(xī)條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫(xiàn)設定在剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一(yī)次(cì)實(shí)驗(yàn)中同時滿(mǎn)足，否(fǒu)則(zé)該次實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑：有明顯的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為可疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於可疑樣本建議復核一次，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期(qī)，則(zé)判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng)，否則判定(dìng)為陰性；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙染，試劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存不當或試劑(jì)配製不準確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下降，可能會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果。
PCR反應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成反應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
無乳鏈球(qiú)菌(jūn)PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與模板的正確結合是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模(mó)板的結合及引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延伸是遵循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性(xìng)，使反應中模板與引(yǐn)物的結(jié)合(復性)可以(yǐ)在較高的溫度下(xià)進行(háng)，結(jié)合的特(tè)異性(xìng)大大(dà)增加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的靶基因(yīn)片段也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持(chí)很高的正確度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異(yì)性(xìng)和保守性(xìng)高的靶基因(yīn)區，其特異性(xìng)程度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以指數方式(shì)增加的，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始待測(cè)模板擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中，PCR的靈敏度可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在細菌學中zui小檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一次性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液和水浴鍋上(shàng)進行變性-退火(huǒ)-延(yán)伸反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成(chéng)擴增反應。擴增產物一(yī)般用電泳分(fēn)析，不(bù)一定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位素，無(wú)放(fàng)射性汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對標本(běn)的純度(dù)要求低(dī)
不需要(yào)分離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為擴(kuò)增模板。可(kě)直接(jiē)用臨(lín)床標本(běn)如(rú)血液，體腔(qiāng)液，洗嗽液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
- 上一條(tiáo)：犬鏈(liàn)球菌PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
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