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產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱 | 貨號 |
|
海豚鏈(liàn)球(qiú)菌PCR檢測試劑盒(hé) |
Streptococcus iniaePCR |
YS-P014786 |
分類：PCR檢測試劑盒
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有效期一般為1年，這(zhè)是指在適(shì)當的儲(chǔ)存溫度下(xià)。核酸擴增部分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般要(yào)貯存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析條件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性(xìng)質控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高點。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品的檢測結果應為陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需(xū)在(zài)一次(cì)實驗中同時滿足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗視為無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑：有明顯的指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本；對(duì)於可(kě)疑樣本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核(hé)一次，若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng)，否則判定為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指數擴(kuò)增期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定(dìng)為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙(wū)染，試劑(jì)汙染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存(cún)不(bù)當或試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不(bù)準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢測效(xiào)能(néng)下降，可能會導致出現假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的特異性與保守性。
海豚鏈球菌PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的正(zhèng)確結合是關(guān)鍵。引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸是遵循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚合酶合(hé)成反應的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫性，使反應中模板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(hé)(復性)可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的溫度(dù)下進(jìn)行，結合(hé)的(dí)特(tè)異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶基(jī)因片(piàn)段也就能保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正確度。再通(tōng)過(guò)選擇特異(yì)性(xìng)和保(bǎo)守性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區，其特異性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指數方式增加的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個細胞(bāo)中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位)；在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次(cì)性地將(jiāng)反應液加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增液和水浴(yù)鍋上進(jìn)行變性-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時完(wán)成擴增反應。擴(kuò)增產物一般用電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一(yī)定要用同(tóng)位素(sù)，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對標本的(dí)純度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分(fēn)離(lí)病毒或細菌及培養細(xì)胞，DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標本如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
