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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱 | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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豬(zhū)鏈球(qiú)菌(jūn)通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Streptococcus suiPCR |
YS-P014794 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免反復凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有效期(qī)：一年(nián)
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒的有效(xiào)期(qī)一(yī)般為1年(nián)，這是(shì)指在(zài)適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一般要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結(jié)果分(fēn)析條件設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰性質控品擴增曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高點。
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢測結(jié)果應為陽(yáng)性，有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在(zài)一次實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足，否(fǒu)則該次實驗視(shì)為無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本；對於可(kě)疑樣本建議(yì)復核一次，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增期，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品交叉汙染會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試(shì)劑運輸，保存(cún)不當或試劑(jì)配製不準(zhǔn)確(què)引起的(dí)試劑檢測效能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能會導致(zhì)出現假陰性(xìng)結果。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)；
④靶基因(yīn)的特(tè)異(yì)性與保守性(xìng)。
豬(zhū)鏈球(qiú)菌(jūn)通用PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中(zhōng)引物與模板(bǎn)的正確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合(hé)及引物鏈的延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基配對原則的(dí)。聚合(hé)酶合成(chéng)反應的(dí)忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性，使反(fǎn)應中模板(bǎn)與(yǔ)引物的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的(dí)特異(yì)性大(dà)大增加(jiā)，被擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段也(yě)就能(néng)保持(chí)很(hěn)高的正確度(dù)。再通(tōng)過選擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的靶(bǎ)基因區，其特異(yì)性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物(wù)的生(shēng)成量是(shì)以指(zhǐ)數方(fāng)式增(zēng)加的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測模(mó)板擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中檢出(chū)一個(gè)靶細胞；在病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位(wèi))；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行變(biàn)性-退火-延(yán)伸反應，一(yī)般(bān)在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產物一(yī)般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一(yī)定要用同位素(sù)，無放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對標本的純度(dù)要(yào)求低(dī)
不需要分離(lí)病毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直接(jiē)用臨床標(biāo)本如血液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發，細(xì)胞，活PCR技術概論。
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