產品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英(yīng)文名稱 | 貨號(hào) |
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蘇丹埃(āi)博(bó)拉(lā)病(bìng)毒(dú)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé) |
Sudan Ebola Virus RTPCR |
YS-P014807 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲存條件：-20℃避光(guāng)保存，避免反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效(xiào)期：一年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑盒的(dí)有效(xiào)期(qī)一般(bān)為(wéi)1年，這是指在適當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一(yī)般(bān)要貯存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡量避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析(xī)條件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過正常陰(yīn)性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足，否則(zé)該次實驗視為無效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可(kě)疑(yí)樣本；對於可(kě)疑樣(yàng)本建議復核(hé)一次(cì)，若(ruò)復核結果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增期，則判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對檢驗(yàn)結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境汙(wū)染，試劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會出(chū)現假陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸，保(bǎo)存不(bù)當或試劑配製不準確引起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢測效(xiào)能(néng)下(xià)降，可能(néng)會(huì)導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特(tè)異性：
②鹼基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特異(yì)性與(yǔ)保守性。
蘇丹埃(āi)博(bó)拉病毒PCR檢測試劑盒其中引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)正確結合是關(guān)鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基配對原則的。聚合酶合(hé)成(chéng)反應的忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫度(dù)下進行，結(jié)合的(dí)特異性(xìng)大大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片段也就(jiù)能保持很(hěn)高的正確(què)度(dù)。再(zài)通過選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基(jī)因(yīn)區(qū)，其特異性(xìng)程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成(chéng)量是以指數方(fāng)式增加的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起(qǐ)始待測模(mó)板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞中(zhōng)檢出一(yī)個(gè)靶細胞；在病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單(dān)位)；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次性地(dì)將反應液加好後，即在DNA擴增液和水浴(yù)鍋(guō)上進行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴增(zēng)反應。擴增產物一般用(yòng)電(diàn)泳分析(xī)，不(bù)一定(dìng)要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素(sù)，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純(chún)度要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要分(fēn)離病毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直接用臨床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發，細胞，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
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