產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
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克氏(shì)食道(dào)綫(xiàn)蟲PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé) |
Oesophagostomum clumbianumPCR |
YS-P014528 |
分類(lèi)：PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反復凍融(róng)。
運輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效期(qī)：一年(nián)
貨期：現貨PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期一(yī)般為1年(nián)，這是(shì)指在適(shì)當的儲存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分的試劑一般要(yào)貯存於-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部分試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量避免反復(fù)凍融(róng)。
【結果分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰性質(zhì)控(kòng)品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質控品的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性，有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需在一次實驗中同(tóng)時滿足，否則該次實驗(yàn)視為無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑：有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為可疑樣本(běn)；對於可疑樣本(běn)建議復(fù)核(hé)一(yī)次，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期(qī)，則(zé)判(pàn)定為陽性(xìng)，否則判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙(wū)染會(huì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸，保存(cún)不當(dāng)或試(shì)劑(jì)配製不(bù)準確(què)引起的試劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下降，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出現假陰性(xìng)結果。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特(tè)異性(xìng)與保守(shǒu)性。
克氏食(shí)道(dào)綫蟲PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)其中引物與模(mó)板的(dí)正(zhèng)確(què)結合是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的結合及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應中(zhōng)模板(bǎn)與引物的結合(復(fù)性)可以在較高的(dí)溫度下(xià)進(jìn)行(háng)，結合的特(tè)異性大(dà)大增加，被擴增(zēng)的(dí)靶基因(yīn)片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的(dí)正確(què)度。再(zài)通過選擇特(tè)異性和保守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其特異性程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量是(shì)以指數方(fāng)式(shì)增(zēng)加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細(xì)胞中檢出一個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病毒(dú)的檢測中，PCR的(dí)靈(líng)敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位)；在(zài)細菌學中zui小檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液(yè)加好後(hòu)，即(jí)在DNA擴增液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上進行變性-退火-延伸反應，一(yī)般(bān)在2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴增(zēng)產物一般用(yòng)電(diàn)泳分析(xī)，不一(yī)定要用(yòng)同位(wèi)素(sù)，無放射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度(dù)要求低(dī)
不(bù)需要(yào)分離病毒或(huò)細(xì)菌及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增模板(bǎn)。可直(zhí)接用臨(lín)床標本如(rú)血液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽液，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術概論(lùn)。
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