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PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品名稱 | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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大森(sēn)林(lín)埃博(bó)拉病毒PCR檢測試劑盒(hé) |
Tai Forest Ebola Virus RTPCR |
YS-P014818 |
分類：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
儲存條件：-20℃避光保存(cún)，避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效期(qī)一般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是指在(zài)適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下。核酸(suān)擴增(zēng)部分(fēn)的試劑一(yī)般(bān)要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析條件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常陰性質控(kòng)品擴增曲綫的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢測結果(guǒ)應為陽(yáng)性，有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴增期，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需(xū)在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足(zú)，否則該次實(shí)驗視為(wéi)無(wú)效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑：有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣本建(jiàn)議復(fù)核一次，若(ruò)復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，則判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對檢驗結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品交叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸，保存(cún)不當或試(shì)劑(jì)配製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降，可(kě)能(néng)會導致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異(yì)性與保守(shǒu)性。
大森林埃(āi)博拉(lā)病毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模(mó)板(bǎn)的結合(hé)及引物(wù)鏈的延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性，使反應中(zhōng)模板與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(復性(xìng))可以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度下(xià)進(jìn)行，結(jié)合的(dí)特異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的靶基因(yīn)片段也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的正確度。再通過選擇特異性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區，其特異性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的生成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指數(shù)方式(shì)增加(jiā)的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待(dài)測模板擴增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個細胞中(zhōng)檢出一個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒(dú)的檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單位(wèi))；在細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應用(yòng)耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一次性地將(jiāng)反(fǎn)應液加好後(hòu)，即在DNA擴增液和水浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變性-退火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一(yī)般在2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴增反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產物一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不一定要用同位素(sù)，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純度(dù)要求低(dī)
不(bù)需(xū)要分離病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可作為(wéi)擴增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本如(rú)血液，體腔液，洗嗽液，毛(máo)發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術概論。
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