產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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馬生(shēng)殖(zhí)泰勒氏菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Taylorella equigenitalisPCR |
YS-P014824 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保存(cún)，避免(miǎn)反復凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光。
有(yǒu)效期：一(yī)年
貨期：現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有(yǒu)效期一般(bān)為1年，這是(shì)指在(zài)適當的儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下。核酸擴(kuò)增部分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般要貯存(cún)於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反復凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常陰性(xìng)質控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需(xū)在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中同時滿足(zú)，否則該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本；對於(yú)可(kě)疑樣本建(jiàn)議復核(hé)一次(cì)，若復核結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性，否則(zé)判(pàn)定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑汙染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試(shì)劑(jì)配(pèi)製(zhì)不(bù)準確(què)引(yǐn)起的試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出(chū)現假(jiǎ)陰性結(jié)果。
PCR反應(yīng)的特異(yì)性：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成反應的忠(zhōng)實性；
④靶基(jī)因的特異(yì)性與保守性。
馬(mǎ)生殖(zhí)泰(tài)勒(lè)氏菌PCR檢測試劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與模板的正確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵。引(yǐn)物與模(mó)板的結(jié)合及引物鏈的延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼基配(pèi)對原(yuán)則的。聚(jù)合酶合(hé)成反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結合(復性)可以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度(dù)下進行，結合(hé)的(dí)特異性(xìng)大大增加，被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能(néng)保持很高的(dí)正確(què)度。再通過(guò)選擇(zé)特(tè)異(yì)性和保守性高的靶基(jī)因區(qū)，其特異性(xìng)程度就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量是以指(zhǐ)數(shù)方式增加的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待測模(mó)板(bǎn)擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈敏度可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反應液加(jiā)好後，即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進(jìn)行變性-退火-延(yán)伸(shēn)反應(yīng)，一般在2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增(zēng)反應。擴(kuò)增(zēng)產物一般用電泳(yǒng)分析(xī)，不一定要(yào)用(yòng)同位素，無放射性(xìng)汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純(chún)度(dù)要求低
不(bù)需要分(fēn)離(lí)病毒或細菌及培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用臨(lín)床(chuáng)標本如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技術概論。
