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PCR檢測試劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英文名稱 | 貨(huò)號 |
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美(měi)洲四棱綫蟲PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé) |
Tetrameres americanaPCR |
YS-P014828 |
分類：PCR檢測試(shì)劑盒
儲存(cún)條件：-20℃避光保存，避(bì)免(miǎn)反復凍融。
運輸：低(dī)溫，避光。
有效期：一(yī)年
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有效期一般為1年，這是指在(zài)適當的儲存(cún)溫度下。核酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的試劑(jì)一般(bān)要貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復凍融。
【結果分(fēn)析條件設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫設定(dìng)在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品擴增曲(qū)綫的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果應為陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，Ct值應小於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足(zú)，否則(zé)該(gāi)次實驗視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可疑樣(yàng)本；對於可(kě)疑樣(yàng)本建(jiàn)議復核(hé)一次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判定為陽性，否則判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環境汙染，試(shì)劑汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存不(bù)當或試劑配(pèi)製(zhì)不準確(què)引起的試劑檢測(cè)效能下(xià)降，可能(néng)會(huì)導致出現假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應(yīng)的特異性：
②鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶基因的特(tè)異性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
美洲(zhōu)四棱綫(xiàn)蟲PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正確(què)結合是(shì)關(guān)鍵。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合及引物鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則的。聚合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較高的溫(wēn)度下(xià)進行，結(jié)合(hé)的特異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加，被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的(dí)正確(què)度(dù)。再通(tōng)過(guò)選擇(zé)特異(yì)性和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶基因(yīn)區(qū)，其特異性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量是以指(zhǐ)數方(fāng)式增(zēng)加的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶細胞；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成單(dān)位)；在(zài)細菌學中zui小檢出(chū)率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性(xìng)地將反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增液和(hé)水浴鍋上進行(háng)變性(xìng)-退火-延伸反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴增(zēng)反應。擴增產物一(yī)般用電(diàn)泳(yǒng)分析，不一(yī)定(dìng)要用同位(wèi)素，無放(fàng)射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標本的純(chún)度要(yào)求低
不(bù)需要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及培養細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增模(mó)板。可直接(jiē)用臨床(chuáng)標本如(rú)血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
