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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
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旋毛蟲(chóng)通用PCR檢測試劑盒 |
Trichinella spp.PCR |
YS-P014857 |
分類：PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸：低溫(wēn)，避光。
有效期：一年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑盒的有(yǒu)效期(qī)一般(bān)為1年(nián)，這是指在適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫度下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部分的(dí)試(shì)劑一般要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部分(fēn)試劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍(dòng)融(róng)。
【結果分析條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過正常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控品擴(kuò)增曲(qū)綫的最高點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質控品(pǐn)的(dí)檢測結(jié)果應為陽(yáng)性，有明顯的(dí)指數擴(kuò)增期，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需在一(yī)次實驗中同時(shí)滿(mǎn)足，否則該(gāi)次(cì)實驗視為(wéi)無(wú)效。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑：有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對於可疑樣本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一次(cì)，若(ruò)復核(hé)結(jié)果Ct<40且有指數擴增(zēng)期，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性，否則(zé)判定為陰(yīn)性；
3. 陰性：無(wú)指數擴增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰性樣本(běn)。
【對檢驗結果的(dí)解釋】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染，樣品交叉汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試劑配(pèi)製不準確(què)引(yǐn)起的試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能下(xià)降，可能(néng)會導(dǎo)致出現假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保守性(xìng)。
旋毛(máo)蟲通(tōng)用PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模板(bǎn)的正(zhèng)確結合(hé)是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板的(dí)結合及引(yǐn)物鏈的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則的。聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性(xìng)，使反應中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的結(jié)合(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較(jiào)高的溫度下進行，結合的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加，被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段也就能(néng)保(bǎo)持很高的正(zhèng)確度。再通過(guò)選擇特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基因區(qū)，其(qí)特(tè)異性程度就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物的(dí)生成量是以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增加的(dí)，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測模板(bǎn)擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個細胞(bāo)中檢出(chū)一個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒的(dí)檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位)；在細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應液加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴鍋上(shàng)進行變(biàn)性-退(tuì)火-延伸(shēn)反應，一般在2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴增產物一(yī)般用電泳(yǒng)分析，不一定要用(yòng)同位(wèi)素(sù)，無放射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純度(dù)要(yào)求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板(bǎn)。可直(zhí)接用(yòng)臨床標(biāo)本如血液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術概論。
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