產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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差異脲原(yuán)體PCR檢測試(shì)劑盒 |
Ureaplasma diversumPCR |
YS-P014894 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效期：一年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的(dí)有效期一般為(wéi)1年，這是(shì)指在適當(dāng)的儲(chǔ)存溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑(jì)一(yī)般要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好超過正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴增曲綫的(dí)最高(gāo)點。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢測(cè)結(jié)果應為(wéi)陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需在(zài)一(yī)次實驗中同時滿足，否則該(gāi)次實驗視為(wéi)無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯的(dí)指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可(kě)疑樣本；對(duì)於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建議復核(hé)一次，若(ruò)復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有指數擴增期，則(zé)判定為陽性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙染，試劑汙(wū)染，樣(yàng)品交叉汙(wū)染會出(chū)現假陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑運輸(shū)，保存(cún)不(bù)當或(huò)試劑(jì)配(pèi)製不準確(què)引起的(dí)試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能下降，可能會(huì)導致出現假陰性結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特異性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性與保(bǎo)守性。
差(chà)異脲(niào)原體(tǐ)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其中引物(wù)與模板的正確結(jié)合是(shì)關鍵(jiàn)。引物與模板(bǎn)的(dí)結合及引物鏈的延(yán)伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配對原(yuán)則(zé)的。聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性(xìng)，使反應中模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(hé)(復性)可以(yǐ)在較高的(dí)溫度(dù)下進行(háng)，結合的特(tè)異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基因片段也就(jiù)能保持(chí)很高(gāo)的正確度(dù)。再通(tōng)過選擇特異(yì)性(xìng)和保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶基因區，其特異(yì)性程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的生成量是以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式增加(jiā)的(dí)，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測(cè)模板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個細胞中檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在病(bìng)毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單(dān)位)；在(zài)細(xì)菌學中zui小檢(jiǎn)出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地將(jiāng)反應(yīng)液加好後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋上(shàng)進行變(biàn)性(xìng)-退火-延伸(shēn)反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增(zēng)反應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析，不一定要(yào)用(yòng)同位(wèi)素(sù)，無放射性汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度要求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒或細菌及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床標本(běn)如(rú)血液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽液，毛發(fā)，細胞，活(huó)PCR技術概論。
