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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱 | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨號 |
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脲原體(tǐ)通(tōng)用PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
Ureaplasma spp.PCR |
YS-P014895 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸：低(dī)溫，避光。
有效期：一年(nián)
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的(dí)有效期一(yī)般為1年，這是指在適當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫度(dù)下。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑一般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設定在(zài)剛好超過正常(cháng)陰性質控品(pǐn)擴增曲(qū)綫的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品(pǐn)的檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性，有明顯的(dí)指數擴增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需(xū)在一次實驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無效。
【結(jié)果判斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣本(běn)；對於可疑樣本建議復核(hé)一次，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增期，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰性樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣品交叉汙染(rǎn)會出現假陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試(shì)劑配製不準確引(yǐn)起的(dí)試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下(xià)降，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結(jié)果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應的(dí)忠實(shí)性(xìng)；
④靶基(jī)因的特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
脲(niào)原(yuán)體(tǐ)通用(yòng)PCR檢測試劑盒其(qí)中引物(wù)與模板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合是(shì)關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板的結合及(jí)引物(wù)鏈的延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以在較高的溫度下(xià)進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的特異性大(dà)大增加，被擴增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段也(yě)就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的(dí)正確度。再通過選(xuǎn)擇特(tè)異性和(hé)保守(shǒu)性高(gāo)的靶基因(yīn)區(qū)，其特(tè)異性程度就更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方式增加(jiā)的，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞；在病(bìng)毒的(dí)檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達3個RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單位(wèi))；在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地(dì)將反應液(yè)加好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行變(biàn)性-退火(huǒ)-延(yán)伸反應，一(yī)般在(zài)2～4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反應(yīng)。擴增產物一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳分析(xī)，不一定(dìng)要用同(tóng)位素(sù)，無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染，易推廣。
(4) 對標本的(dí)純度(dù)要(yào)求低
不需要(yào)分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗(cū)製品及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床標本如(rú)血液(yè)，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術(shù)概論。
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