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產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑盒
商品屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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西尼羅病毒(dú)PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
West Nile Virus(WNV)RTPCR |
YS-P014918 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存(cún)，避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一年
貨期：現貨(huò)PCR試劑盒的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在(zài)適(shì)當的儲存溫度下(xià)。核酸擴增部(bù)分的試(shì)劑(jì)一般(bān)要貯存於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部分試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免反(fǎn)復凍融(róng)。
【結果分析條件(jiàn)設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫設定在剛好(hǎo)超過正常陰性質(zhì)控(kòng)品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控品的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應為陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需在一(yī)次實(shí)驗中同時滿足，否則(zé)該次(cì)實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑樣本(běn)；對(duì)於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核一(yī)次，若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng)，否則判定為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙染會出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試劑(jì)運輸，保(bǎo)存不(bù)當或試劑配製不(bù)準確(què)引(yǐn)起的試劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假陰(yīn)性結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
西(xī)尼羅(luó)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正確結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模板的結(jié)合(hé)及引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則的(dí)。聚合(hé)酶(méi)合成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引物的結合(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度(dù)下進(jìn)行，結合的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的靶基因片(piàn)段也就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高的正確度。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性高的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區(qū)，其特異(yì)性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的生成(chéng)量是以(yǐ)指數方式(shì)增加(jiā)的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒的檢測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水浴鍋(guō)上進行變性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一般在2～4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產物一(yī)般(bān)用電泳(yǒng)分析，不一定要(yào)用同位素，無放射性汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要求低
不需(xū)要(yào)分離(lí)病毒(dú)或細菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直接用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本如(rú)血液，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞，活PCR技術概(gài)論。
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