產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名稱 | 貨(huò)號 |
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同白斑綜合症(zhèng)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
White Spot Syndrome Virus(WSSV，MBV)PCR |
YS-P014920 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保存(cún)，避免反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的有效(xiào)期一般為1年，這是(shì)指(zhǐ)在適當的儲存溫度(dù)下(xià)。核酸擴增部(bù)分的試(shì)劑(jì)一般要貯存於-20℃下，產物檢測部分試劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定在剛好(hǎo)超(chāo)過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢測結果應為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期，Ct值應(yīng)小於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需(xū)在(zài)一次實驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足，否則(zé)該(gāi)次(cì)實驗視(shì)為無(wú)效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的指數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可疑樣本(běn)；對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復核一次(cì)，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否則判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定(dìng)為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會(huì)出(chū)現假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存不當或試(shì)劑配製(zhì)不(bù)準確(què)引起(qǐ)的試劑(jì)檢測效(xiào)能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能會(huì)導(dǎo)致出(chū)現假(jiǎ)陰性結果。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的特異性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
同(tóng)白(bái)斑(bān)綜(zōng)合症病毒(dú)PCR檢測試劑(jì)盒其(qí)中引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結合(hé)是關(guān)鍵。引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合及引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則的。聚(jù)合酶(méi)合成反應的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性，使反應中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物的(dí)結合(hé)(復性)可以在較高的(dí)溫度(dù)下進(jìn)行(háng)，結(jié)合的特(tè)異性(xìng)大大(dà)增加，被擴增(zēng)的靶基因片(piàn)段也就(jiù)能(néng)保持很高(gāo)的(dí)正確度。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇特異(yì)性和保守性高的(dí)靶基(jī)因區(qū)，其特(tè)異性(xìng)程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成量(liáng)是以指數方式增(zēng)加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個細胞中檢(jiǎn)出一個靶細胞；在(zài)病毒(dú)的檢測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單位)；在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在DNA擴增液(yè)和水浴鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸反應，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不一定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無放射性汙(wū)染，易推(tuī)廣。
(4) 對標本的純(chún)度要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離(lí)病毒或細(xì)菌及(jí)培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床標(biāo)本如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技術概(gài)論。
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