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PCR檢測試劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文(wén)名稱 | 貨號 |
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黃熱病病毒(dú)疫苗株(zhū)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
Yellow Fever Virus( vaccine strain,17D)17D RTPCR |
YS-P014930 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保存，避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
運輸：低溫，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一年
貨期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期一般為1年，這(zhè)是指在適當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度下。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑一(yī)般要貯存於-20℃下，產物(wù)檢測(cè)部分試(shì)劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫設定(dìng)在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正常陰性(xìng)質(zhì)控品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高點。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質控品的檢測(cè)結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值應(yīng)小於等於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同時滿足，否(fǒu)則該次實(shí)驗視為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判斷】
2.可疑：有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為(wéi)可疑樣本(běn)；對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本建議復核(hé)一(yī)次(cì)，若復(fù)核結果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，則判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品交叉汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存不(bù)當或試(shì)劑配(pèi)製不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢測效能下降，可能(néng)會導致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應(yīng)的特異性：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應的(dí)忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異性與保守(shǒu)性。
黃(huáng)熱病病毒疫(yì)苗株(zhū)PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基配(pèi)對(duì)原則的(dí)。聚合酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫(wēn)性，使反(fǎn)應中模板與(yǔ)引物的(dí)結(jié)合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在較高的溫度(dù)下進(jìn)行(háng)，結(jié)合的特異(yì)性大大(dà)增加，被擴增(zēng)的靶基因片段也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很高的(dí)正確度。再通過(guò)選擇(zé)特異性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其特異性程(chéng)度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成(chéng)量是以指(zhǐ)數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬(wàn)個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病毒的檢測中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達3個RFU(空斑形成單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi)，一次性地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加好後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴鍋(guō)上(shàng)進行變性(xìng)-退(tuì)火-延伸(shēn)反應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴增產物一般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析，不一定(dìng)要用同位(wèi)素(sù)，無(wú)放(fàng)射(shè)性汙(wū)染，易推廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的(dí)純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低(dī)
不需(xū)要(yào)分離病毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增模板。可直接用(yòng)臨床標本如血液(yè)，體腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
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