產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測試劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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魯(lǔ)氏(shì)耶爾森菌(jūn)PCR檢測試劑盒 |
Yersinia ruckeriPCR |
YS-P014937 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避光。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨期：現貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有效期一(yī)般為1年，這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增部(bù)分的試(shì)劑一般(bān)要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值綫設(shè)定在剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正常(cháng)陰性質控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫的最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品的檢測結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性，有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值應小於等(děng)於35；
3. 以上要求需(xū)在(zài)一次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否則該次實驗視為無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑樣本；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣本(běn)建議(yì)復核一次(cì)，若(ruò)復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，則判定為陽性，否(fǒu)則判定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙染(rǎn)，試劑汙染，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會出(chū)現假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸，保存不(bù)當或(huò)試劑配(pèi)製不(bù)準確(què)引(yǐn)起的試劑(jì)檢測效能(néng)下降，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現假陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特異性：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的(dí)特異(yì)性與保守性(xìng)。
魯氏耶爾森菌PCR檢測試劑(jì)盒其(qí)中引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板(bǎn)的結合(hé)及引物鏈的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚合酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫(wēn)性，使反應(yīng)中(zhōng)模板與引物(wù)的結合(hé)(復性(xìng))可以在較高的(dí)溫度(dù)下(xià)進行(háng)，結合(hé)的(dí)特(tè)異性大(dà)大增加(jiā)，被擴增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段也(yě)就能保持(chí)很(hěn)高的正確(què)度。再(zài)通過選擇(zé)特異性和保(bǎo)守性高(gāo)的靶基(jī)因區(qū)，其特(tè)異(yì)性程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量是(shì)以指數方式(shì)增(zēng)加的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在病毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單(dān)位(wèi))；在(zài)細(xì)菌學中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次性地將(jiāng)反應(yīng)液加好後，即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增反應(yīng)。擴增(zēng)產物一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一(yī)定要用同位(wèi)素，無放射性汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不(bù)需要(yào)分(fēn)離(lí)病毒或(huò)細菌及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模板。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技術概(gài)論。
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