產(chǎn)品中心
PCR檢測(cè)試劑盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品名(míng)稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
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鼻(bí)疽假(jiǎ)單(dān)胞菌(jūn)PCR檢測試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P014954 |
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免反復凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫(wēn)，避光。
有效期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般為1年，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的儲(chǔ)存(cún)溫度下。核(hé)酸擴增部分的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反復(fù)凍融。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫設定在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性(xìng)質控品擴增曲綫的最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控品的(dí)檢測結(jié)果應為陽性，有明顯的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應(yīng)小於等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在(zài)一次實驗中同時滿(mǎn)足，否則該(gāi)次(cì)實驗視為無效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯的(dí)指數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對於可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增期，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng)，否則判定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解釋】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣(yàng)品交叉(chā)汙染會(huì)出現假陽性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或試劑配製不準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑檢測(cè)效能下降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的特異性與(yǔ)保守性(xìng)。
鼻(bí)疽(jū)假單(dān)胞菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其中引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正確(què)結合是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的(dí)結合及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板(bǎn)與(yǔ)引物的(dí)結(jié)合(復性)可以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫度下(xià)進行(háng)，結(jié)合的特(tè)異(yì)性大大增加(jiā)，被擴增的靶基因片(piàn)段也就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再(zài)通過選(xuǎn)擇特(tè)異(yì)性和(hé)保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區，其特(tè)異(yì)性(xìng)程度(dù)就更高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的生成量是(shì)以指(zhǐ)數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測模板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞(bāo)中檢出一個(gè)靶細胞(bāo)；在(zài)病毒的檢測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單位)；在細(xì)菌學中zui小檢出率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進行變性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應，一(yī)般(bān)在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴增反應。擴增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳分(fēn)析，不一定(dìng)要用同位素，無放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純(chún)度要(yào)求低
不(bù)需(xū)要(yào)分離(lí)病毒(dú)或(huò)細(xì)菌及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增模(mó)板。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床標本如血液(yè)，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術概(gài)論。
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