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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
| 產(chǎn)品名稱 | 規格 | 貨(huò)號(hào) |
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大豆NOS/SS PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P014987 |
儲存(cún)條件:-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存,避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū):低溫(wēn),避光。
有效期:一年
貨期(qī):現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一般(bān)為1年(nián),這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲(chǔ)存溫(wēn)度下。核(hé)酸擴(kuò)增部分(fēn)的試劑(jì)一般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià),產(chǎn)物檢測部分(fēn)試(shì)劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍融(róng)。

u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將閾(yù)值綫設定在剛好超過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的最高(gāo)點。
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的檢(jiǎn)測結(jié)果應為陽性(xìng),有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期(qī),Ct值應小於等於(yú)35;
3. 以上要求需在一(yī)次(cì)實驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足(zú),否(fǒu)則該次(cì)實驗視為無(wú)效。
2.可疑(yí):有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期(qī),且38≤Ct<40,此時(shí)樣本為可疑樣本(běn);對(duì)於可(kě)疑樣本建議(yì)復核一次(cì),若復(fù)核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增期,則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性(xìng),否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng);
3. 陰(yīn)性:無指數擴增期(qī),Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn),試劑(jì)汙染,樣(yàng)品交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果(guǒ);
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸,保(bǎo)存(cún)不(bù)當或試(shì)劑(jì)配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起的(dí)試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下降,可能(néng)會(huì)導致出現假陰(yīn)性結果(guǒ)。

②鹼基配(pèi)對(duì)原則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性;
④靶(bǎ)基(jī)因的特異性與(yǔ)保(bǎo)守性。
大(dà)豆(dòu)NOS/SS PCR檢測試劑盒(hé)其中引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的結(jié)合及引物鏈(liàn)的延伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)的。聚合酶合成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性(xìng),使反(fǎn)應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的(dí)溫度(dù)下(xià)進(jìn)行,結(jié)合的特異性(xìng)大(dà)大增加,被(bèi)擴增的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也(yě)就能(néng)保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的正確(què)度(dù)。再通(tōng)過(guò)選擇(zé)特異(yì)性(xìng)和保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區,其(qí)特(tè)異性(xìng)程度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數方(fāng)式增加的(dí),能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出一個靶(bǎ)細胞;在(zài)病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中(zhōng),PCR的(dí)靈敏度可(kě)達3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位);在(zài)細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶,一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反應液加好(hǎo)後,即在(zài)DNA擴增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行變性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應,一(yī)般在2~4 小時完成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴增產物(wù)一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分析,不一定要(yào)用同位素,無(wú)放射(shè)性(xìng)汙染,易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度要求低(dī)
不(bù)需(xū)要分離(lí)病毒(dú)或細菌(jūn)及(jí)培(péi)養細(xì)胞,DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為擴(kuò)增模板。可直接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血液(yè),體腔(qiāng)液(yè),洗嗽液,毛(máo)發,細(xì)胞,活PCR技術概論(lùn)。
