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PCR檢測試(shì)劑盒
商(shāng)品屬性
| 產品(pǐn)名稱 | 規格 | 貨(huò)號 |
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對蝦白斑病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015011 |
儲存(cún)條件：-20℃避光保存(cún)，避免反復(fù)凍融(róng)。
運輸：低溫，避光。
有效(xiào)期：一年
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一(yī)般為1年(nián)，這是指(zhǐ)在適(shì)當的儲(chǔ)存(cún)溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增部分的(dí)試劑一(yī)般要貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測部分試劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結果分析條(tiáo)件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾值綫設定在(zài)剛(gāng)好超過(guò)正常陰性質控(kòng)品擴增(zēng)曲綫的最高(gāo)點。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性，有明顯的指數(shù)擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在(zài)一次實驗中同時滿(mǎn)足，否則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果判斷】
2.可(kě)疑：有明顯的指數擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為(wéi)可疑樣本；對於可(kě)疑樣本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次，若(ruò)復核結果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定為陽性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰性：無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室環境汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽性結果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效能下(xià)降，可能(néng)會導致出現假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特異性與保守(shǒu)性(xìng)。
對(duì)蝦(xiā)白(bái)斑(bān)病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合是(shì)關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚合酶合成反應的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫性，使反應(yīng)中模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結(jié)合(復性)可(kě)以(yǐ)在較高的(dí)溫度下(xià)進行，結合的(dí)特(tè)異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段也就能保持(chí)很(hěn)高的正確度。再通(tōng)過(guò)選擇特異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高的靶(bǎ)基因區，其特異(yì)性程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成量是以指(zhǐ)數方式增加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待測模板擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個細(xì)胞(bāo)中檢出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的檢測中，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單(dān)位)；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出(chū)率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次(cì)性地將反(fǎn)應(yīng)液加好後(hòu)，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變性(xìng)-退火-延伸反應，一(yī)般在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增產物一般用電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一定要用同(tóng)位素，無放(fàng)射(shè)性汙染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度要(yào)求(qiú)低
不需(xū)要(yào)分離(lí)病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及(jí)培養細(xì)胞，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床標本如(rú)血液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞，活(huó)PCR技術(shù)概論。
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