產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱(chēng) | 規格 | 貨(huò)號 |
|
對蝦杆(gān)狀病(bìng)毒PCR檢測試劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015012 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存，避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避光。
有(yǒu)效期：一年
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒的有(yǒu)效期一般為1年，這(zhè)是(shì)指在適當的(dí)儲(chǔ)存溫度下(xià)。核(hé)酸擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑一(yī)般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設定在剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰性質(zhì)控品擴增曲綫的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品(pǐn)的檢測結果應為陽(yáng)性(xìng)，有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，Ct值應(yīng)小於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一(yī)次(cì)實驗中(zhōng)同時滿足，否則(zé)該次(cì)實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣本(běn)；對於可疑樣本(běn)建議復核一(yī)次，若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增(zēng)期，則(zé)判定為陽性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品交叉汙染會出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存不(bù)當或試劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑(jì)檢測效能(néng)下(xià)降，可能(néng)會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特異性：
②鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應的(dí)忠實性；
④靶基(jī)因的特(tè)異性(xìng)與保(bǎo)守性。
對(duì)蝦杆(gān)狀(zhuàng)病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)其中引物與模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是(shì)關鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈的延伸是(shì)遵循鹼基配對原則的(dí)。聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高(gāo)溫性，使反(fǎn)應中模板與引物的結合(復(fù)性)可以在較高(gāo)的溫度(dù)下進行(háng)，結(jié)合的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能(néng)保持(chí)很(hěn)高的正(zhèng)確(què)度。再通過選擇特(tè)異性和保守(shǒu)性(xìng)高的靶基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異(yì)性(xìng)程度就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生成量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測(cè)模板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個靶細(xì)胞；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單(dān)位)；在細菌(jūn)學中zui小檢出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一次(cì)性地將反應液(yè)加好後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行變(biàn)性-退火-延伸(shēn)反應，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小時完成擴增反應。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一(yī)般用電泳(yǒng)分(fēn)析，不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同(tóng)位素，無(wú)放射(shè)性汙(wū)染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分離(lí)病毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗(cū)製品及總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴(kuò)增模板。可直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本(běn)如血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論。
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