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產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名(míng)稱(chēng) | 規格 | 貨號(hào) |
|
肺(fèi)耐藥蛋(dàn)白基因PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015019 |
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光保存(cún)，避免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運輸：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的有效期一(yī)般為1年，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的儲存(cún)溫度下。核酸擴增部(bù)分的(dí)試劑(jì)一(yī)般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下，產物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結(jié)果(guǒ)分析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設定在剛好超過(guò)正常陰(yīn)性質控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性，有明顯的(dí)指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在(zài)一次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗視為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑樣本；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建議復(fù)核一(yī)次(cì)，若復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則(zé)判定為(wéi)陽性(xìng)，否則判定為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉汙(wū)染會出(chū)現假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保存(cún)不當或試劑配製不準(zhǔn)確引起(qǐ)的試(shì)劑檢測效能(néng)下降，可能會(huì)導致出現假陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實性；
④靶基(jī)因(yīn)的特異性與保(bǎo)守性。
肺耐藥蛋白基(jī)因PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其中引物與(yǔ)模(mó)板的正確結合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模板的結合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高溫(wēn)性(xìng)，使反應中模(mó)板(bǎn)與引物的結(jié)合(復性)可(kě)以在(zài)較高(gāo)的溫度下進行，結合(hé)的(dí)特異性大(dà)大增加(jiā)，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段也就能(néng)保持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通過(guò)選擇(zé)特異性(xìng)和保守性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其特異性程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以指數方式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個細胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病(bìng)毒(dú)的檢測中，PCR的靈敏度可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單(dān)位)；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一次性(xìng)地將反應液(yè)加好後，即(jí)在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退火-延(yán)伸反(fǎn)應，一般(bān)在(zài)2～4 小時完成擴增(zēng)反應(yīng)。擴增(zēng)產物一般用電泳分析(xī)，不一(yī)定要用(yòng)同位素(sù)，無放射(shè)性汙染，易推廣。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度要求(qiú)低
不需(xū)要分離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可作為(wéi)擴增模板。可直接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標本(běn)如(rú)血(xiě)液，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞，活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
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