產品中心(xīn)
PCR檢測試劑(jì)盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 規格 | 貨號 |
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風疹病(bìng)毒(dú)PCR檢測試劑盒 |
50T |
YS-P015024 |
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存，避免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有(yǒu)效期一般(bān)為1年，這是指在適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核酸擴增部分的(dí)試劑一般(bān)要(yào)貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測部(bù)分(fēn)試劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分析(xī)條件設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛好超過(guò)正(zhèng)常陰性質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢測(cè)結果(guǒ)應為陽(yáng)性，有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視為無(wú)效。
【結(jié)果判斷】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可(kě)疑樣本(běn)建議復(fù)核一次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增期(qī)，則判(pàn)定(dìng)為陽性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出(chū)現假陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存不(bù)當(dāng)或(huò)試劑配製不準確引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑檢測(cè)效能下降，可(kě)能會(huì)導致出現(xiàn)假陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特異性：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的特異性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性。
風疹病毒(dú)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) 其(qí)中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的正確結合(hé)是關鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合(hé)及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基配對原(yuán)則的。聚合酶合成(chéng)反應的(dí)忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高(gāo)溫性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(hé)(復性)可以在較高(gāo)的(dí)溫度下(xià)進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的特異性大大(dà)增加，被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片段也就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高的(dí)正確度(dù)。再通過(guò)選(xuǎn)擇特異(yì)性和保守性(xìng)高的靶(bǎ)基因區，其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待測模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位(wèi))；在細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性地將(jiāng)反(fǎn)應液加好(hǎo)後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液(yè)和(hé)水浴鍋上(shàng)進行(háng)變性-退火(huǒ)-延(yán)伸反(fǎn)應，一(yī)般在(zài)2～4 小時完(wán)成擴增(zēng)反應。擴增產物一般(bān)用電泳分(fēn)析，不一(yī)定要(yào)用同位素，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純(chún)度(dù)要(yào)求低(dī)
不需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒或細菌及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可作為擴增(zēng)模(mó)板。可直(zhí)接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本如血液，體腔(qiāng)液，洗嗽液，毛發，細(xì)胞，活PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
