產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號 |
|
庚型肝(gān)炎(yán)病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015036 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低溫，避光。
有(yǒu)效期：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期(qī)一般(bān)為1年，這是(shì)指在適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核酸擴增部(bù)分的試(shì)劑(jì)一般要貯存於-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復凍(dòng)融。
【結果分析(xī)條件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正常陰性質控品擴(kuò)增(zēng)曲綫的(dí)最高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的(dí)檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性，有(yǒu)明(míng)顯的指數(shù)擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求需在一(yī)次實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則該次實(shí)驗視為無效。
【結果判斷】
2.可(kě)疑：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核(hé)一次，若(ruò)復核結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定為陽性，否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰性：無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰性樣(yàng)本。
【對檢驗結果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙染，試劑汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙染會出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存不(bù)當或試(shì)劑配製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢測效能下(xià)降(jiàng)，可能(néng)會導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結果。
PCR反應的特異性：
②鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶基因的(dí)特異性與(yǔ)保守性。
庚型肝炎病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其(qí)中引(yǐn)物與模板的正確(què)結合是關鍵(jiàn)。引物與模板的(dí)結合(hé)及引物鏈的延(yán)伸是遵(zūn)循鹼基配對原則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫性，使反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引物的結(jié)合(hé)(復性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高的溫度(dù)下進行(háng)，結(jié)合的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大大增加，被擴增的(dí)靶基因片(piàn)段(duàn)也就能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高的正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過選擇(zé)特(tè)異(yì)性和(hé)保(bǎo)守性高的靶(bǎ)基因區(qū)，其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生(shēng)成(chéng)量是以指(zhǐ)數方式增(zēng)加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出一個靶細胞；在(zài)病毒(dú)的檢測中，PCR的靈(líng)敏度可達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反應液加好後，即(jí)在(zài)DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行變性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一般在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一般用電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位(wèi)素，無放射性(xìng)汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需要分離病毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及培養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總RNA均可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板。可(kě)直接用臨床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛(máo)發，細胞，活PCR技術概論(lùn)。
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