產品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試劑盒
商品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格(gé) | 貨號 |
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副(fù)傷寒杆菌PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015034 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有效(xiào)期：一(yī)年
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑盒的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存溫(wēn)度下。核酸擴(kuò)增(zēng)部分的試(shì)劑一般要(yào)貯存於-20℃下，產物檢測部(bù)分試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結果分析(xī)條件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫設(shè)定在剛好超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性(xìng)質控品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應為陽性(xìng)，有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等於35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需(xū)在(zài)一次實驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則該次實驗視為(wéi)無效。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議復核一次，若復(fù)核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指數擴增期(qī)，則(zé)判定為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準確引起的(dí)試劑檢測效能下降(jiàng)，可能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的特(tè)異性：
②鹼基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性(xìng)與保守性。
副傷寒杆(gān)菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的正確結合是關鍵。引物與模板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈的延(yán)伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫(wēn)性，使反應中模板與引物(wù)的結(jié)合(hé)(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的(dí)溫度下進(jìn)行，結合(hé)的特(tè)異性大(dà)大增(zēng)加，被擴(kuò)增的(dí)靶基因片段(duàn)也就能保(bǎo)持很高的正確(què)度(dù)。再通過選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性(xìng)和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶基因區(qū)，其特異性(xìng)程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量是以指數(shù)方式增加的，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板擴(kuò)增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢測中，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位)；在細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次性地將反應(yīng)液加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行(háng)變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小時(shí)完(wán)成擴增反應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一定要(yào)用同(tóng)位素，無(wú)放射(shè)性汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離(lí)病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增模板。可直(zhí)接用(yòng)臨床標本(běn)如(rú)血(xiě)液，體腔液，洗(xǐ)嗽液，毛發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
