產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢測試劑盒(hé)
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 規格(gé) | 貨(huò)號 |
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古(gǔ)典豬瘟病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015040 |
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免反復凍(dòng)融。
運輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有效期一般(bān)為1年，這是指在適當的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸擴(kuò)增部分的試(shì)劑一般要貯存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析(xī)條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性質控品擴增曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性質控品的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應為陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值應小於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在(zài)一次實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足，否則該(gāi)次實驗(yàn)視為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為可疑樣本；對(duì)於可(kě)疑樣本建議(yì)復核(hé)一次(cì)，若復核(hé)結果Ct<40且有指數擴(kuò)增(zēng)期，則判定為陽性，否則判定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙染會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不當或(huò)試(shì)劑(jì)配(pèi)製不準確(què)引(yǐn)起的(dí)試劑檢測(cè)效能下降(jiàng)，可能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假陰性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實性；
④靶基因(yīn)的特異性(xìng)與保守性(xìng)。
古(gǔ)典豬瘟病(bìng)毒PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其中(zhōng)引物與(yǔ)模板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關鍵。引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)結合及(jí)引物(wù)鏈的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則的。聚合酶合成反應的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板與(yǔ)引物的結合(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就能保(bǎo)持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異(yì)性和保守性(xìng)高的靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其特異性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待測模(mó)板(bǎn)擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒(dú)的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位(wèi))；在(zài)細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶，一次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應液加好後(hòu)，即(jí)在DNA擴增液(yè)和(hé)水浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一般在(zài)2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反應(yīng)。擴增產物一般(bān)用電泳(yǒng)分析，不一定要用(yòng)同位(wèi)素，無(wú)放射(shè)性汙染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度要求低
不需要(yào)分離病毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均可(kě)作為擴增模板。可直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
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