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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品名稱(chēng) | 規格(gé) | 貨號(hào) |
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漢(hàn)坦病毒Ⅱ型PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015044 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避光保存，避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避光。
有效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的有效(xiào)期(qī)一般(bān)為1年，這是(shì)指在適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部分的(dí)試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存於-20℃下，產物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑(jì)則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反(fǎn)復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值綫設定(dìng)在剛好(hǎo)超過(guò)正常陰(yīn)性質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的最高點。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為陽性，有(yǒu)明顯的指數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要求需在一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為無效(xiào)。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為可疑樣本；對(duì)於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復核一(yī)次(cì)，若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有指數擴增期(qī)，則判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否則判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙(wū)染會(huì)出現假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保存不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準確引(yǐn)起的試劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下降(jiàng)，可能會導致(zhì)出現(xiàn)假陰性結(jié)果。
PCR反應的特異性：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特異性與保守性(xìng)。
漢坦病毒Ⅱ型PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其中引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結合是關鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結合及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚合酶合成反應的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性，使反應中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的(dí)結合(hé)(復性(xìng))可以在較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度下進行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大大增加，被擴增(zēng)的靶基因片段也(yě)就能(néng)保持(chí)很(hěn)高的正確度。再(zài)通過選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和保守性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基因區，其特異性程度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量(liáng)是以指(zhǐ)數方式增(zēng)加的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待測(cè)模板擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一個靶細(xì)胞；在病毒的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈敏度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單位(wèi))；在細(xì)菌學中zui小檢出率為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退火-延伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時完(wán)成擴增反應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析，不一定要用(yòng)同位素(sù)，無放射性(xìng)汙染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度(dù)要(yào)求(qiú)低(dī)
不需要分離(lí)病毒或細菌及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論。
