產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 規(guī)格 | 貨(huò)號 |
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基(jī)孔肯雅病毒PCR檢測試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015063 |
儲存條件：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期(qī)一(yī)般為(wéi)1年，這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般(bān)要(yào)貯存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫設定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過正常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增曲(qū)綫的最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢測結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性，有明顯的指數(shù)擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在一次實驗(yàn)中同時(shí)滿足，否(fǒu)則該次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可疑樣本；對於(yú)可疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復核一次(cì)，若復(fù)核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，則(zé)判定(dìng)為陽性，否則判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙染(rǎn)，試劑汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試劑(jì)檢測效能下(xià)降，可能(néng)會(huì)導致出現(xiàn)假陰性結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基因(yīn)的(dí)特異性與保守(shǒu)性。
基(jī)孔(kǒng)肯(kěn)雅(yǎ)病毒(dú)PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合(hé)是(shì)關鍵。引物與模(mó)板的結合及引物鏈的延伸是遵循(xún)鹼基配對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板(bǎn)與引物(wù)的結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以在(zài)較高的溫度(dù)下(xià)進行(háng)，結合的(dí)特異(yì)性大大增加(jiā)，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片(piàn)段也(yě)就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高的正(zhèng)確度。再通(tōng)過選擇特(tè)異性(xìng)和保守性高(gāo)的靶基因區，其(qí)特(tè)異性(xìng)程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的生成(chéng)量是以指數(shù)方(fāng)式增加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始待測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位(wèi))；在細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶，一(yī)次性地(dì)將反應液(yè)加好後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反應，一般在(zài)2～4 小時(shí)完成擴增反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物一(yī)般用電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不(bù)一(yī)定要用同位(wèi)素(sù)，無放射性汙(wū)染，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分離(lí)病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及培(péi)養細胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直接用(yòng)臨床標本如血(xiě)液，體腔液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技術概(gài)論。
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