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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
金黃色(sè)葡(pú)萄(táo)球(qiú)菌熱(rè)穩定定(dìng)核酸酶(Dnasebp)常(cháng)規(guī)PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
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金黃色葡(pú)萄球菌熱(rè)穩定定核(hé)酸(suān)酶(méi)(Dnasebp)常規PCR檢測試劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015080 |
儲存條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避(bì)免反復凍融。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有效期：一年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試(shì)劑盒的有效(xiào)期一(yī)般(bān)為1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的儲存溫度下(xià)。核酸擴增部(bù)分的(dí)試劑(jì)一般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分試(shì)劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免反復(fù)凍融。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析條件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值綫設定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最高點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性，有(yǒu)明(míng)顯的指數擴(kuò)增期，Ct值應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在一(yī)次實驗中同(tóng)時滿足(zú)，否則(zé)該次實驗視為無效。
【結(jié)果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復核一次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增期(qī)，則(zé)判定為陽性，否(fǒu)則判定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰(yīn)性樣本。
【對檢驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染，樣(yàng)品交叉(chā)汙(wū)染會(huì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當或試劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑檢測效能下降(jiàng)，可能(néng)會導致(zhì)出現假陰性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異(yì)性(xìng)與保守(shǒu)性。
金(jīn)黃(huáng)色葡萄球(qiú)菌(jūn)熱穩定定(dìng)核酸酶(Dnasebp)常(cháng)規(guī)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其中引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的正確結(jié)合(hé)是關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板的結(jié)合及引物(wù)鏈的延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫(wēn)性，使(shǐ)反應中模(mó)板與(yǔ)引物的結合(復(fù)性(xìng))可以在較高(gāo)的溫(wēn)度下(xià)進行，結(jié)合(hé)的特異(yì)性(xìng)大大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基因片段也就能保(bǎo)持很高(gāo)的正(zhèng)確度。再通過選擇特異性和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶基因區，其特(tè)異性程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物的(dí)生成量(liáng)是(shì)以指數方式增加的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在病(bìng)毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性地將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後，即(jí)在(zài)DNA擴增液和(hé)水浴(yù)鍋上進行變性(xìng)-退火-延伸反應，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產物(wù)一般用電(diàn)泳分(fēn)析，不一定(dìng)要用(yòng)同位素(sù)，無放射性汙染(rǎn)，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純度要求低(dī)
不需(xū)要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或細菌及培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及(jí)總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直接用臨(lín)床標本如血液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術概論(lùn)。
