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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
| 產品名稱 | 規格 | 貨(huò)號 |
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貓冠狀病毒PCR檢測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015130 |
儲(chǔ)存條件:-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún),避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸:低(dī)溫(wēn),避(bì)光。
有(yǒu)效期(qī):一(yī)年(nián)
貨(huò)期(qī):現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期(qī)一般(bān)為1年,這是(shì)指(zhǐ)在適當(dāng)的儲(chǔ)存溫度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部分的試(shì)劑(jì)一般要貯存(cún)於-20℃下(xià),產物檢測部分試劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復凍(dòng)融。

u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設定在剛好超(chāo)過正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控品擴(kuò)增曲綫的(dí)最高點。
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢測結果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性,有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期,Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35;
3. 以上要(yào)求(qiú)需(xū)在一(yī)次實驗(yàn)中同時(shí)滿(mǎn)足,否則該次(cì)實驗(yàn)視為無(wú)效。
2.可疑(yí):有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期,且38≤Ct<40,此時樣(yàng)本為(wéi)可疑樣本;對(duì)於可疑樣(yàng)本(běn)建議復(fù)核(hé)一次(cì),若復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴增期,則(zé)判定為陽性(xìng),否則判(pàn)定為陰性(xìng);
3. 陰(yīn)性:無指數擴增期(qī),Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙染,試(shì)劑(jì)汙(wū)染,樣品(pǐn)交叉(chā)汙染(rǎn)會出現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ);
2. 試(shì)劑運輸,保存(cún)不當或(huò)試劑配製不準(zhǔn)確(què)引起的試(shì)劑(jì)檢測效能下(xià)降,可能(néng)會導致出現假(jiǎ)陰性(xìng)結果(guǒ)。

②鹼基配(pèi)對原(yuán)則;
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng);
④靶基因的特異(yì)性與保(bǎo)守性。
貓(māo)冠狀(zhuàng)病(bìng)毒PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其中引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確結合(hé)是關鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的(dí)結合及引(yǐn)物(wù)鏈的延伸是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)的。聚合酶(méi)合成(chéng)反應的忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫(wēn)性(xìng),使(shǐ)反(fǎn)應中模板與引(yǐn)物(wù)的結合(hé)(復性(xìng))可(kě)以在較高的(dí)溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行,結合(hé)的特異(yì)性大大(dà)增(zēng)加,被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片段也(yě)就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確度。再(zài)通(tōng)過選擇特異(yì)性和保守性(xìng)高(gāo)的靶基因區(qū),其(qí)特(tè)異(yì)性程度就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量(liáng)是(shì)以(yǐ)指數方(fāng)式(shì)增加的,能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶細胞;在病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中,PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單位(wèi));在(zài)細菌學中zui小檢出(chū)率為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便,快速(sù)
PCR反應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶,一次(cì)性地將(jiāng)反應液加好(hǎo)後,即在DNA擴增(zēng)液(yè)和水浴鍋(guō)上(shàng)進行變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應,一般在2~4 小(xiǎo)時(shí)完成擴(kuò)增反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析,不一定要(yào)用(yòng)同(tóng)位素,無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染,易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求(qiú)低
不(bù)需(xū)要分離病(bìng)毒或細(xì)菌及培(péi)養細胞,DNA 粗(cū)製品及總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增模板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標本如血(xiě)液,體(tǐ)腔液,洗嗽液,毛發(fā),細(xì)胞,活PCR技術概(gài)論。
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