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產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 規格 | 貨(huò)號(hào) |
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牛(niú)巴(bā)氏杆(gān)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015148 |
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光保存，避免反復凍(dòng)融(róng)。
運輸：低溫，避光。
有(yǒu)效期：一年
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有效期一般(bān)為1年(nián)，這是指(zhǐ)在適當的(dí)儲存溫度下。核酸擴增(zēng)部(bù)分的試劑(jì)一般(bān)要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡量避免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結(jié)果分析(xī)條件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質控品擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期，Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一(yī)次實驗中同(tóng)時滿足，否(fǒu)則該次實驗視為無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本；對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本建議復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增期，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存(cún)不(bù)當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不(bù)準確引(yǐn)起(qǐ)的試劑(jì)檢測效能下降，可能會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應的(dí)特異(yì)性：
②鹼基(jī)配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
牛(niú)巴氏杆菌PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與(yǔ)模板的結合及(jí)引物鏈的(dí)延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)的。聚合酶合成反(fǎn)應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫性(xìng)，使反(fǎn)應中模板與(yǔ)引物的(dí)結合(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度下(xià)進行(háng)，結(jié)合的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增加(jiā)，被擴(kuò)增的(dí)靶基因片段也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過選擇特異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區，其(qí)特異性程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數方式增加(jiā)的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待測模(mó)板擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢出一個(gè)靶細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中，PCR的(dí)靈(líng)敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反應液加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴(kuò)增反應(yīng)。擴增(zēng)產物一般用電泳(yǒng)分析，不一定要用(yòng)同位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射性汙(wū)染，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度(dù)要求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分離病毒或細(xì)菌及培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可作為擴增(zēng)模(mó)板。可直接(jiē)用臨(lín)床標本如血液，體腔液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞，活PCR技術概論(lùn)。
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