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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
| 產品(pǐn)名稱 | 規格(gé) | 貨(huò)號 |
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破(pò)傷(shāng)風杆(gān)菌PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015167 |
儲存條件(jiàn):-20℃避(bì)光保存,避(bì)免反復凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū):低溫(wēn),避光。
有效期:一(yī)年
貨(huò)期(qī):現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的有(yǒu)效期一(yī)般(bān)為1年,這(zhè)是(shì)指在(zài)適當的儲存(cún)溫度下。核酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試劑(jì)一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。

u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將(jiāng)閾值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控品擴增(zēng)曲綫的最高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽性質控品的(dí)檢(jiǎn)測結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng),有(yǒu)明顯的(dí)指數擴增期,Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於35;
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足,否則(zé)該次(cì)實驗視(shì)為無效(xiào)。
2.可(kě)疑:有明(míng)顯的指數(shù)擴增期(qī),且38≤Ct<40,此時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本(běn);對於可(kě)疑樣本建(jiàn)議復核一(yī)次(cì),若復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期,則(zé)判定為(wéi)陽性,否則(zé)判(pàn)定為陰(yīn)性;
3. 陰(yīn)性:無指數擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結(jié)果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染,試劑汙(wū)染,樣(yàng)品交叉(chā)汙染會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(guǒ);
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū),保存(cún)不當或(huò)試劑配(pèi)製不準確引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢測(cè)效能(néng)下降(jiàng),可(kě)能會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰(yīn)性結果(guǒ)。

②鹼(jiǎn)基配對原則(zé);
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應的忠(zhōng)實(shí)性;
④靶基因(yīn)的特異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
破傷(shāng)風(fēng)杆菌PCR檢測試劑盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的正(zhèng)確結合是關鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸是遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則的。聚(jù)合(hé)酶合成反(fǎn)應的忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高(gāo)溫性,使(shǐ)反應(yīng)中模板與引物的結合(hé)(復性)可(kě)以在(zài)較(jiào)高的(dí)溫度(dù)下(xià)進行,結合的特異性(xìng)大(dà)大(dà)增加(jiā),被擴增的靶(bǎ)基因片段(duàn)也就能保持很高的正確度。再(zài)通過選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高(gāo)的靶(bǎ)基因(yīn)區,其(qí)特(tè)異性(xìng)程度就(jiù)更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量是(shì)以指(zhǐ)數方式(shì)增加的(dí),能將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待測模板擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢出一個(gè)靶細胞;在病毒(dú)的(dí)檢測中,PCR的靈敏度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位(wèi));在(zài)細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便,快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一(yī)次性地將反應(yīng)液加(jiā)好後,即(jí)在DNA擴(kuò)增液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行變性-退火-延(yán)伸(shēn)反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析,不(bù)一(yī)定要(yào)用(yòng)同位素(sù),無放射性(xìng)汙染(rǎn),易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度要求低(dī)
不需要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴增模板。可(kě)直接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如(rú)血液,體(tǐ)腔液(yè),洗嗽液(yè),毛發(fā),細胞(bāo),活PCR技術概論。
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