產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒
禽(qín)流(liú)感病(bìng)毒基因(yīn)分型PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 規格(gé) | 貨(huò)號(hào) |
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禽(qín)流(liú)感病(bìng)毒(dú)基(jī)因分型(xíng)PCR檢測(cè)試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015181 |
儲(chǔ)存條件(jiàn):-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún),避免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
運輸:低(dī)溫,避光。
有(yǒu)效期:一年(nián)
貨(huò)期(qī):現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一般為(wéi)1年(nián),這是指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的儲存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增部分的試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存於-20℃下(xià),產(chǎn)物檢測部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。

u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng):將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定在(zài)剛(gāng)好超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果應為(wéi)陽(yáng)性,有明顯的指數擴(kuò)增期,Ct值應小於等於35;
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在(zài)一次實驗中同時(shí)滿足(zú),否(fǒu)則(zé)該次(cì)實驗視為(wéi)無(wú)效。
2.可疑:有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期,且38≤Ct<40,此時(shí)樣本為(wéi)可疑樣本;對(duì)於(yú)可疑樣本建議復(fù)核一(yī)次,若復核結果Ct<40且(qiě)有指數擴增期,則判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性,否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性:無(wú)指(zhǐ)數擴增期,Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定為(wéi)陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙(wū)染,試(shì)劑(jì)汙染(rǎn),樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性結果(guǒ);
2. 試劑運輸,保存不(bù)當(dāng)或試(shì)劑(jì)配製(zhì)不準確引起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下降(jiàng),可(kě)能(néng)會導致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結果。

②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠實性;
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特異性(xìng)與(yǔ)保守性(xìng)。
禽(qín)流感病毒(dú)基(jī)因分(fēn)型PCR檢測試劑盒(hé)其中引(yǐn)物與模板(bǎn)的(dí)正確結(jié)合是(shì)關鍵。引(yǐn)物與模板(bǎn)的(dí)結合及(jí)引(yǐn)物鏈的延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高溫性(xìng),使反應中模板與引物(wù)的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可以在(zài)較高的溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行(háng),結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加,被(bèi)擴增的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片(piàn)段(duàn)也(yě)就能(néng)保持(chí)很(hěn)高(gāo)的(dí)正(zhèng)確(què)度。再通過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異性和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區,其特異性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量(liáng)是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增(zēng)加(jiā)的(dí),能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測(cè)模板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶細胞(bāo);在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測中,PCR的靈敏度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位(wèi));在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶(méi),一次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加好後(hòu),即在(zài)DNA擴增液和水浴(yù)鍋上進(jìn)行變(biàn)性-退火-延伸反應,一般在2~4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物(wù)一般用電(diàn)泳(yǒng)分析(xī),不(bù)一(yī)定要用同位(wèi)素,無放射(shè)性(xìng)汙(wū)染,易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純度要求(qiú)低(dī)
不(bù)需要分(fēn)離(lí)病毒(dú)或細菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞,DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為擴增模(mó)板。可直接用臨(lín)床(chuáng)標本如血液,體(tǐ)腔(qiāng)液,洗(xǐ)嗽(sòu)液,毛發,細(xì)胞,活PCR技術概(gài)論。
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