產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢測試劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
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禽(qín)流感通用(yòng)型H-H亞(yà)型PCR試劑盒 |
50T |
YS-P015182 |
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保存(cún)，避(bì)免反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光。
有效期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑盒的有效(xiào)期一(yī)般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在適當的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑一般要貯存於-20℃下，產物(wù)檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑(jì)則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復凍融。
【結果分析條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過正常陰性質控品擴增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應(yīng)為陽性，有明顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本；對於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議(yì)復(fù)核一次(cì)，若復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有指數擴增(zēng)期，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否則判定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣(yàng)品交叉汙染會(huì)出現(xiàn)假陽性結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不(bù)當或(huò)試劑(jì)配製(zhì)不準確引起的試劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特(tè)異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應的忠實性；
④靶基因(yīn)的(dí)特(tè)異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
禽流感通(tōng)用型(xíng)H-H亞型PCR試劑盒其中引物(wù)與(yǔ)模板的正(zhèng)確結合是關鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的(dí)結合(hé)及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合成反應的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高溫(wēn)性(xìng)，使反應中模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物的結合(hé)(復性(xìng))可(kě)以在較高的(dí)溫度下進行(háng)，結(jié)合(hé)的特異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴增(zēng)的靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也就能保持很高的正確(què)度(dù)。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異(yì)性(xìng)和保守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶基(jī)因區，其(qí)特異(yì)性程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成量是以指數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌(jūn)學中zui小檢出率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次(cì)性地將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應(yīng)，一般在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般用電(diàn)泳分析(xī)，不(bù)一定要用(yòng)同位素(sù)，無放(fàng)射性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度要求低(dī)
不(bù)需要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作為擴(kuò)增模(mó)板。可直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術概論。
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