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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 規格 | 貨(huò)號 |
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人(rén)Cosmc基因PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
50T |
YS-P015189 |
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件:-20℃避光(guāng)保(bǎo)存,避免反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸:低(dī)溫(wēn),避(bì)光(guāng)。
有效期:一年(nián)
貨(huò)期(qī):現(xiàn)貨PCR試劑盒的有效期(qī)一般為(wéi)1年,這是指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試劑(jì)一般(bān)要貯(zhù)存於(yú)-20℃下,產物(wù)檢測部(bù)分試劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。

u 閾值(Threshold)設定:將(jiāng)閾(yù)值綫設定在剛好(hǎo)超過正(zhèng)常陰(yīn)性質控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高點。
2. 陽性質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果應為陽性(xìng),有明顯的指數擴(kuò)增期,Ct值(zhí)應小於等於35;
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一次實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足(zú),否則(zé)該(gāi)次(cì)實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無效(xiào)。
2.可疑(yí):有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本(běn);對於可疑樣本建議復核一次(cì),若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī),則判定(dìng)為(wéi)陽性(xìng),否則(zé)判定為陰性(xìng);
3. 陰(yīn)性:無指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的(dí)解釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙染(rǎn),試劑汙(wū)染,樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染會(huì)出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ);
2. 試劑(jì)運(yùn)輸,保存不當或試劑配(pèi)製不準確引(yǐn)起的(dí)試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降,可能會導(dǎo)致出(chū)現假陰性結果。

②鹼基配(pèi)對原則(zé);
③Taq DNA聚合酶合成反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng);
④靶基因(yīn)的特(tè)異(yì)性與保守性(xìng)。
人(rén)Cosmc基(jī)因(yīn)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的正確結(jié)合(hé)是關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結合(hé)及引物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵循鹼基配(pèi)對原(yuán)則的。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫性,使反應中模板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(復性)可以在較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進行,結(jié)合的特異性大大(dà)增(zēng)加,被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過選擇(zé)特異(yì)性(xìng)和保守性高的靶基因區,其特異性(xìng)程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wù)的生成量是以指(zhǐ)數方式增加(jiā)的(dí),能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細胞;在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測中,PCR的靈(líng)敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單(dān)位);在細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便,快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi),一(yī)次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反應液加好後,即(jí)在(zài)DNA擴增液和(hé)水浴鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變性-退(tuì)火-延伸反應,一般(bān)在(zài)2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析(xī),不一(yī)定要(yào)用(yòng)同位(wèi)素(sù),無放(fàng)射性汙染,易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純度(dù)要(yào)求低
不(bù)需要分離病毒(dú)或(huò)細(xì)菌(jūn)及培養細(xì)胞,DNA 粗製(zhì)品及總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴增模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床標(biāo)本如(rú)血液,體(tǐ)腔液(yè),洗嗽液,毛發(fā),細(xì)胞(bāo),活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
