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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商品屬性
| 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格(gé) | 貨號 |
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人免疫(yì)缺陷病毒PCR檢測試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015210 |
儲存條件：-20℃避光(guāng)保存，避免(miǎn)反復凍融(róng)。
運輸：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑盒的有效期(qī)一(yī)般為1年，這是指在(zài)適當的(dí)儲存溫度(dù)下。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑一般要(yào)貯存於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部(bù)分試(shì)劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量避免反復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析條件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定在剛好超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品擴增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性，有明顯的指數(shù)擴增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要求需在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中(zhōng)同時滿足(zú)，否(fǒu)則(zé)該次實驗視為無(wú)效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可(kě)疑樣(yàng)本；對(duì)於可疑樣本(běn)建議(yì)復核一次，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判定為陽性，否則判定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判定(dìng)為陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境汙染，試(shì)劑(jì)汙染，樣品交叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存不當(dāng)或試(shì)劑配製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引起的試(shì)劑檢測效能下降(jiàng)，可(kě)能會導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異性與保(bǎo)守性(xìng)。
人免疫(yì)缺陷(xiàn)病(bìng)毒PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中引物與模板的正確(què)結合是(shì)關鍵。引物(wù)與模板的結合(hé)及引物(wù)鏈的(dí)延伸是(shì)遵循(xún)鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(復(fù)性(xìng))可以在較(jiào)高的溫度下(xià)進行，結合的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的靶基(jī)因片段也就能保(bǎo)持很高的正確度。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異性和保守性(xìng)高的靶基因區(qū)，其特異性程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞(bāo)中檢出一個靶(bǎ)細胞；在(zài)病(bìng)毒的檢測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位)；在(zài)細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反(fǎn)應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地將反(fǎn)應(yīng)液加好後，即在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進行變性-退火(huǒ)-延伸反應，一(yī)般(bān)在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴增反應。擴增(zēng)產物一(yī)般用電泳(yǒng)分析(xī)，不一(yī)定(dìng)要用同(tóng)位素(sù)，無放射性汙(wū)染，易推廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度(dù)要(yào)求低(dī)
不需要分離(lí)病毒或細菌及培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可(kě)作為擴增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床(chuáng)標本如血(xiě)液，體(tǐ)腔液，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論。
