產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
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人綫粒體DNA PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015222 |
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免反復凍融。
運輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一年
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑盒的有(yǒu)效期(qī)一般為1年，這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫度下(xià)。核(hé)酸擴增部(bù)分的(dí)試劑(jì)一般要貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量避免反復凍(dòng)融。
【結果分析(xī)條件設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值(zhí)綫設(shè)定在剛(gāng)好超過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽(yáng)性質控品的檢(jiǎn)測結果應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有明顯的指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求需在一次實驗中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該次實(shí)驗(yàn)視為無效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本；對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核(hé)一(yī)次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且有指數擴增期，則判定為陽性，否則判定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均判定(dìng)為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試劑運輸，保存(cún)不(bù)當(dāng)或(huò)試劑配(pèi)製不準確(què)引起(qǐ)的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降(jiàng)，可能會導(dǎo)致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特(tè)異性(xìng)：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成反應的忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
人綫(xiàn)粒體DNA PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結合(hé)是關鍵。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的結(jié)合及(jí)引物鏈(liàn)的延伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應中模板與引物的結(jié)合(hé)(復性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度下進行(háng)，結合(hé)的(dí)特異(yì)性(xìng)大大(dà)增加，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也就能保持很(hěn)高的(dí)正確(què)度(dù)。再通過(guò)選擇特異性(xìng)和(hé)保守性高的(dí)靶基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異(yì)性(xìng)程度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成量是以指數(shù)方式(shì)增(zēng)加的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一個(gè)靶(bǎ)細胞；在病毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可達3個RFU(空斑形成單位)；在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶(méi)，一次(cì)性地將反應(yīng)液(yè)加好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴增液和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延伸(shēn)反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物一般用電(diàn)泳(yǒng)分析，不(bù)一定(dìng)要用同(tóng)位素，無(wú)放射(shè)性汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度要(yào)求低
不(bù)需要分(fēn)離病毒或(huò)細菌及培(péi)養細胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增模板。可直接用臨(lín)床標本如(rú)血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細胞，活(huó)PCR技術概論。
- 上(shàng)一(yī)條(tiáo)：人(rén)綫粒體(tǐ)DNA位點突變(biàn)PCR測定(dìng)試劑盒(hé)
- 下(xià)一(yī)條(tiáo)：人(rén)細小病(bìng)毒BPCR檢測試劑(jì)盒
