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PCR檢測試劑盒
人(rén)綫粒(lì)體(tǐ)DNA位點(diǎn)突變(biàn)PCR測定(dìng)試劑盒
商品屬性(xìng)
| 產品名(míng)稱(chēng) | 規格 | 貨(huò)號(hào) |
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人綫(xiàn)粒(lì)體DNA位(wèi)點(diǎn)突變PCR測(cè)定試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015223 |
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一年
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的有效(xiào)期一般為(wéi)1年，這是(shì)指在適當(dāng)的儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核酸擴(kuò)增部(bù)分的試(shì)劑一(yī)般(bān)要貯存(cún)於-20℃下，產物檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反復凍融。
【結(jié)果分析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定在剛好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常陰性(xìng)質控品擴(kuò)增曲綫的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小於等於35；
3. 以上要(yào)求需在一(yī)次實驗中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該(gāi)次實驗視為無效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有明顯的(dí)指數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可疑樣本；對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議復核一(yī)次(cì)，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為陰性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會出現假陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運輸，保(bǎo)存(cún)不(bù)當或試(shì)劑(jì)配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起的(dí)試(shì)劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降，可能會(huì)導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)；
④靶基(jī)因的特異(yì)性與保守(shǒu)性(xìng)。
人(rén)綫粒(lì)體(tǐ)DNA位點突變PCR測(cè)定試劑盒其(qí)中引物(wù)與模板的(dí)正確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結合(hé)及引物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫性，使反應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物的(dí)結(jié)合(hé)(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫(wēn)度下進行，結合(hé)的特異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加(jiā)，被擴增(zēng)的靶基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的正(zhèng)確度(dù)。再通過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異性和(hé)保守性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基因區(qū)，其特異性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中zui小檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一次性地將(jiāng)反應液加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變性-退火(huǒ)-延伸反應，一般(bān)在2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反應(yīng)。擴增(zēng)產物一般用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析，不一定要用(yòng)同位素，無放(fàng)射性汙(wū)染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純(chún)度要求(qiú)低
不需(xū)要分離(lí)病毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均可(kě)作為擴增模板(bǎn)。可直接用(yòng)臨(lín)床標本如血(xiě)液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細胞，活(huó)PCR技術概論。
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