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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號 |
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乳(rǔ)腺(xiàn)癌耐(nài)藥基(jī)因PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
50T |
YS-P015236 |
儲(chǔ)存條件：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一年
貨期(qī)：現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有效期(qī)一般為1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在適當的儲存(cún)溫度下(xià)。核酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的試劑一般(bān)要貯存於-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部分試(shì)劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復凍融。
【結果分析條件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過正常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增曲(qū)綫的最高(gāo)點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控品的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需(xū)在一(yī)次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同時滿足(zú)，否(fǒu)則該(gāi)次實驗(yàn)視為無(wú)效(xiào)。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有明顯的指數擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復(fù)核一(yī)次(cì)，若復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有指數擴增期，則判定為(wéi)陽性(xìng)，否則(zé)判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰性樣本。
【對檢驗結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙染會出現假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存不(bù)當或試劑配(pèi)製不(bù)準確(què)引起的試劑(jì)檢測效(xiào)能(néng)下降，可能會導(dǎo)致出現假陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特異性：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反應的(dí)忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特(tè)異性與(yǔ)保守性(xìng)。
乳(rǔ)腺癌(ái)耐藥基(jī)因PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中引物(wù)與模板的正確結合是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引物鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基配對(duì)原則的。聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性(xìng)，使反應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較高的(dí)溫(wēn)度(dù)下(xià)進行，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增的(dí)靶基因(yīn)片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保持(chí)很高(gāo)的正確度。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特異性和(hé)保守(shǒu)性高(gāo)的靶基因區，其特(tè)異(yì)性程度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量(liáng)是以(yǐ)指數方式(shì)增(zēng)加的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板(bǎn)擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出(chū)一(yī)個靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒(dú)的(dí)檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位)；在細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次性地將反(fǎn)應液加好後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行變性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應，一般(bān)在2～4 小時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴增產物一(yī)般用電泳分析，不(bù)一定要(yào)用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放射(shè)性汙(wū)染，易推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純(chún)度要求(qiú)低
不需要(yào)分離病毒(dú)或細(xì)菌及(jí)培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增模板。可直接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如(rú)血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細胞，活PCR技術(shù)概論。
