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PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商品屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
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蝦(xiā)PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015273 |
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免反復凍融。
運輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一(yī)年
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑盒的(dí)有效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是指在適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下。核酸擴增部分的試劑(jì)一般(bān)要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部分試劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析條件設定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過正常(cháng)陰性質(zhì)控(kòng)品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性質控(kòng)品的檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性，有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等於35；
3. 以上(shàng)要求需在一次實驗中同(tóng)時滿足(zú)，否則該次(cì)實驗視(shì)為無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣本(běn)；對於(yú)可疑樣本建議復(fù)核一次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增期，則判定為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則判定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環境汙(wū)染，試劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出現(xiàn)假陽性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存(cún)不當或(huò)試劑配製不準確引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降，可(kě)能會導致出(chū)現假陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異性與保守性。
蝦PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其(qí)中引物與模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結合是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引物鏈的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則的。聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反應的忠實性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反應中(zhōng)模板(bǎn)與引物的(dí)結合(復性)可(kě)以(yǐ)在較高的(dí)溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行，結(jié)合(hé)的(dí)特異性大大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段也(yě)就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高的正確(què)度(dù)。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇特異(yì)性(xìng)和保(bǎo)守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區，其(qí)特(tè)異性程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的生成量是以(yǐ)指數(shù)方式增加的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待測模板擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢出(chū)一個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病毒的檢測中，PCR的靈(líng)敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位)；在細(xì)菌學中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶，一(yī)次性(xìng)地將反應液加好後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液和水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一般用電泳(yǒng)分(fēn)析，不一(yī)定(dìng)要用同位素(sù)，無放射性汙染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純度要求(qiú)低
不需(xū)要(yào)分離(lí)病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品及總RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床標本如血(xiě)液，體腔液，洗嗽液，毛發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術概論。
