產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名(míng)稱 | 規格 | 貨(huò)號 |
|
猩紅熱鏈(liàn)球菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015285 |
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免(miǎn)反復凍融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期(qī)一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適當的儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一般要貯存於(yú)-20℃下，產物檢測部分試劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反復凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析條件設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值綫設定在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常陰(yīn)性質控品擴增曲綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在(zài)一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿足，否則(zé)該次實(shí)驗視(shì)為無(wú)效。
【結果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑樣本(běn)；對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議復核(hé)一次(cì)，若復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則判(pàn)定為陽性，否則判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保存不當或(huò)試劑(jì)配製不準確引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑檢測效能下(xià)降(jiàng)，可能會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假陰性結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異性與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
猩(xīng)紅熱(rè)鏈球菌(jūn)PCR檢測試劑盒其中引物與模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與模板(bǎn)的結(jié)合及引物(wù)鏈的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模(mó)板與引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(復性(xìng))可以在較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下進行(háng)，結合的特異(yì)性(xìng)大(dà)大(dà)增加(jiā)，被擴(kuò)增的靶基因片(piàn)段也就能保(bǎo)持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通過(guò)選擇(zé)特異(yì)性(xìng)和保守性高的靶基(jī)因區(qū)，其特(tè)異性(xìng)程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量是以指數方式增加(jiā)的，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始待(dài)測(cè)模板擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢出(chū)一個靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達3個RFU(空斑形(xíng)成單位(wèi))；在(zài)細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶，一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加好後(hòu)，即在(zài)DNA擴(kuò)增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進行變(biàn)性-退火-延(yán)伸反應，一(yī)般在2～4 小時(shí)完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一(yī)般用電(diàn)泳分析，不一定(dìng)要用(yòng)同位素(sù)，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低(dī)
不(bù)需要(yào)分離(lí)病毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可作為擴增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標本(běn)如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細胞，活PCR技術概(gài)論。
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