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PCR檢測試劑盒(hé)
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 規格 | 貨(huò)號(hào) |
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豬水泡(pào)性口(kǒu)炎病毒PCR檢測試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015352 |
儲存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反復凍融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效期：一年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期一般(bān)為1年，這是指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下。核酸擴增部分(fēn)的試劑一(yī)般要貯存於-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫設定在剛好(hǎo)超過正常陰(yīn)性質控品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的檢測(cè)結果(guǒ)應為(wéi)陽性，有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需在(zài)一(yī)次(cì)實驗中(zhōng)同時滿足，否則該次(cì)實(shí)驗視(shì)為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可疑樣本；對(duì)於(yú)可疑樣本建議復(fù)核一次，若(ruò)復核結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期(qī)，則判定為陽(yáng)性(xìng)，否則判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗室環(huán)境汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉汙染會出現(xiàn)假陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑運輸，保存(cún)不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不(bù)準確(què)引起的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測效能(néng)下降(jiàng)，可能會(huì)導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反應的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應的忠實(shí)性；
④靶基(jī)因的特異(yì)性與保守性。
豬水泡(pào)性口(kǒu)炎(yán)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)其中(zhōng)引物(wù)與模板的(dí)正確結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)結(jié)合及引(yǐn)物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵循鹼基配(pèi)對(duì)原則的(dí)。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中模板與引物的(dí)結(jié)合(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度(dù)下(xià)進行，結合的特(tè)異性(xìng)大(dà)大增(zēng)加，被擴增的靶基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就能保(bǎo)持很高(gāo)的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再通過選擇特異性和保守性高的靶基(jī)因區，其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指數方式(shì)增(zēng)加的(dí)，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測模(mó)板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出一(yī)個靶細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單位)；在細菌學中(zhōng)zui小檢出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次性地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加好後(hòu)，即(jí)在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上(shàng)進行變性-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴增產物(wù)一(yī)般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一定要用同(tóng)位素，無放射性汙染，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度要(yào)求低
不(bù)需要分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為擴增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床標(biāo)本如(rú)血液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細(xì)胞，活PCR技術概(gài)論。
