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產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
|
乙(yǐ)型(xíng)腦(nǎo)炎(yán)病毒(dú)PCR檢測試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015303 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存，避免反復凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫，避光。
有(yǒu)效期：一(yī)年
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效期一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是指在(zài)適當的儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下。核酸擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的試劑一(yī)般(bān)要貯存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復凍融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析(xī)條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾(yù)值綫(xiàn)設定在剛好超過正常陰性質控品(pǐn)擴增曲(qū)綫的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢測結果應(yīng)為陽(yáng)性，有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在一次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足(zú)，否則該次實驗視為無效。
【結果判斷】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為可(kě)疑(yí)樣本；對(duì)於(yú)可疑樣本建(jiàn)議復(fù)核(hé)一次，若復核結果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則(zé)判定為陽性(xìng)，否則判(pàn)定為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判定為(wéi)陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙(wū)染，試劑汙染，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會出現假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保存不當或試劑配製(zhì)不(bù)準確引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測(cè)效能下降，可(kě)能會導致出現假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的(dí)特異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守性。
乙(yǐ)型(xíng)腦炎(yán)病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引物與(yǔ)模板(bǎn)的正確結合是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與模板的結合(hé)及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反應(yīng)中模板與(yǔ)引物的結合(復性)可(kě)以在較高的(dí)溫度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特異性大(dà)大(dà)增加，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也就能(néng)保持(chí)很高(gāo)的正確(què)度。再通過選擇特異性(xìng)和保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區(qū)，其特異性程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生成量是(shì)以指數(shù)方式增加的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細胞(bāo)中(zhōng)檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞；在(zài)病(bìng)毒的檢測(cè)中，PCR的靈(líng)敏度可達3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位)；在細菌學中zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反應液加好後，即(jí)在(zài)DNA擴增液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行變(biàn)性-退火-延(yán)伸(shēn)反應，一(yī)般在2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析(xī)，不一定要用(yòng)同(tóng)位素，無放射性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度(dù)要(yào)求低(dī)
不(bù)需(xū)要分離病毒或(huò)細菌(jūn)及培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可(kě)作為擴增(zēng)模板。可直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床標本(běn)如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發，細胞，活PCR技術概論。
