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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 規格(gé) | 貨(huò)號 |
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玉米GA PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015312 |
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免反復凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有效(xiào)期：一年
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑盒的有效期(qī)一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是指在適(shì)當(dāng)的儲存溫度下。核酸擴增部(bù)分的(dí)試劑一般要(yào)貯存於-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反復凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析條件設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定在剛(gāng)好超過正常(cháng)陰性質(zhì)控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同時滿足，否則(zé)該(gāi)次實驗視為(wéi)無效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對於(yú)可疑樣(yàng)本建議復核(hé)一次，若復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期，則(zé)判定為陽(yáng)性，否則(zé)判定為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定為(wéi)陰性樣本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙染，試劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染會(huì)出(chū)現假陽性結果；
2. 試(shì)劑運輸，保存不當(dāng)或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不準確(què)引起的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降，可(kě)能(néng)會導致(zhì)出現假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特(tè)異(yì)性：
②鹼基配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異性(xìng)與保守性。
玉米GA PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其(qí)中引物與模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確(què)結合(hé)是關鍵。引物與模板(bǎn)的(dí)結合及(jí)引物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵循鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶合(hé)成反應的忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引物的結(jié)合(hé)(復(fù)性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進行(háng)，結合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性大(dà)大(dà)增加(jiā)，被擴增(zēng)的(dí)靶基(jī)因片(piàn)段也就能(néng)保持很高(gāo)的正確(què)度。再通過(guò)選擇特(tè)異(yì)性和保守性高的靶(bǎ)基因區，其(qí)特(tè)異(yì)性程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生成量(liáng)是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始待(dài)測模板擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中檢出(chū)一個(gè)靶細胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位)；在細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴增液(yè)和水浴鍋上進(jìn)行變性(xìng)-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用電泳分(fēn)析，不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無(wú)放射性汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低(dī)
不(bù)需要(yào)分離(lí)病(bìng)毒或細菌(jūn)及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增(zēng)模板。可直(zhí)接(jiē)用臨床(chuáng)標本如(rú)血液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛發，細胞，活(huó)PCR技術概(gài)論(lùn)。
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