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PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產品名(míng)稱 | 規(guī)格 | 貨(huò)號 |
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玉(yù)米(mǐ)GA/MS PCR檢測(cè)試劑盒 |
50T |
YS-P015313 |
儲存條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一(yī)年
貨期：現貨PCR試劑盒(hé)的有效期一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是指在適當的(dí)儲存(cún)溫度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增部分的(dí)試劑一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測部分試劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避免反復(fù)凍(dòng)融。
【結果分(fēn)析條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在剛(gāng)好超過(guò)正(zhèng)常陰性質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫的(dí)最高點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品的(dí)檢測結果應為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct值應小於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需在一(yī)次實驗中(zhōng)同時滿足，否則該(gāi)次實驗(yàn)視(shì)為無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於可疑樣(yàng)本建議(yì)復核一次，若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增期，則判定為(wéi)陽性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰性樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室環(huán)境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣(yàng)品交叉(chā)汙(wū)染會(huì)出(chū)現假陽(yáng)性結果；
2. 試劑(jì)運輸，保存不(bù)當或試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的試(shì)劑檢測效能下降，可能(néng)會(huì)導致出現假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反應的忠(zhōng)實性；
④靶基因(yīn)的(dí)特異性(xìng)與保守性(xìng)。
玉米(mǐ)GA/MS PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引物與模(mó)板的(dí)正(zhèng)確結合是關鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的結合及引物(wù)鏈的延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則(zé)的。聚合(hé)酶(méi)合成反應的忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板(bǎn)與引物的結合(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特(tè)異性(xìng)大大增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也(yě)就能(néng)保(bǎo)持很高(gāo)的正確(què)度(dù)。再通(tōng)過(guò)選擇(zé)特(tè)異性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性高的(dí)靶基(jī)因區(qū)，其特異(yì)性程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數方式增加的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在病(bìng)毒的檢測中，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率(shuài)為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地將反(fǎn)應液加好後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液和水浴(yù)鍋上進(jìn)行(háng)變性-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反應，一般(bān)在(zài)2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反應。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用電泳分(fēn)析(xī)，不一定要用(yòng)同位素，無(wú)放(fàng)射性汙染，易推廣。
(4) 對標本(běn)的純度(dù)要求低
不(bù)需要分離病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技術(shù)概(gài)論。
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