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PCR檢測(cè)試劑盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 規(guī)格(gé) | 貨(huò)號 |
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芝(zhī)麻(má)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015322 |
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒的有效期一般為1年，這是指(zhǐ)在適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴增部分的(dí)試(shì)劑一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下，產物檢測部分試劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過正常陰(yīn)性質控品(pǐn)擴增曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控品的檢測(cè)結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該次實(shí)驗視(shì)為無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑：有明顯的(dí)指數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可疑(yí)樣本；對於(yú)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復核一次(cì)，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則(zé)判定(dìng)為陽性，否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣品交叉汙染(rǎn)會出現(xiàn)假陽性結果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保存(cún)不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製(zhì)不準確引起的(dí)試劑(jì)檢測(cè)效能下降，可能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出現假(jiǎ)陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特(tè)異性：
②鹼基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反應的忠實性(xìng)；
④靶基因(yīn)的(dí)特異性與保(bǎo)守性(xìng)。
芝麻(má)PCR檢測試(shì)劑盒其(qí)中引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)正確(què)結合(hé)是關鍵。引物與(yǔ)模板的結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚合酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高(gāo)溫性(xìng)，使反應中模板與(yǔ)引物(wù)的結合(復性)可以(yǐ)在較高的溫度下進行(háng)，結合(hé)的(dí)特異(yì)性大(dà)大增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片段也(yě)就能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的(dí)正確度(dù)。再(zài)通過(guò)選擇特異性和(hé)保守(shǒu)性高的(dí)靶基因(yīn)區(qū)，其特(tè)異性(xìng)程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生成量是(shì)以指數方式增(zēng)加(jiā)的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測模板擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個細胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成(chéng)單位)；在(zài)細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地將反應(yīng)液(yè)加好後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進行變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一般在2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增產物一般用電(diàn)泳分析(xī)，不一定(dìng)要用同(tóng)位(wèi)素，無放射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純(chún)度要求低(dī)
不需(xū)要分離病(bìng)毒或細菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可作為擴增(zēng)模(mó)板。可直(zhí)接用臨床標本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概(gài)論。
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