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PCR檢測試劑(jì)盒
商品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 規格 | 貨(huò)號 |
|
植物(wù)源性(xìng)成分PCR檢測(cè)試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015323 |
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光。
有效期(qī)：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的有效(xiào)期一般為(wéi)1年，這(zhè)是指在(zài)適當的(dí)儲(chǔ)存溫度下。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑一般(bān)要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結果分析(xī)條件(jiàn)設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設定在剛好超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的檢(jiǎn)測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性(xìng)，有明(míng)顯的(dí)指數擴增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需在一次(cì)實驗中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則該次(cì)實驗視為無效。
【結果判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可疑樣本(běn)；對於可疑(yí)樣本建議復(fù)核(hé)一次，若復(fù)核(hé)結果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，則判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性，否則判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰性樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存不當(dāng)或(huò)試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降，可能會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應(yīng)的特(tè)異性：
②鹼基配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反應的(dí)忠實性；
④靶基(jī)因(yīn)的特異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
植物源性(xìng)成(chéng)分PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其中(zhōng)引物與(yǔ)模板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關鍵。引物與模(mó)板的結合及(jí)引物鏈的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循鹼基配(pèi)對原則的。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模板(bǎn)與引(yǐn)物的結(jié)合(復性)可以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行，結合的(dí)特(tè)異性大大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通過選擇特異性(xìng)和保守性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因區，其特(tè)異(yì)性程度就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的(dí)生成量(liáng)是(shì)以指數方式增(zēng)加的(dí)，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢出一個(gè)靶細胞(bāo)；在病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位)；在(zài)細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地(dì)將反應液(yè)加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸反應，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴增反應(yīng)。擴增(zēng)產物一般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一定要用(yòng)同位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度要求(qiú)低
不需要(yào)分(fēn)離病毒或細(xì)菌及(jí)培養細胞，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可直接用(yòng)臨床標本如血液，體腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
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