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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 規格 | 貨號 |
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誌(zhì)賀氏(shì)菌PCR檢測(cè)試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015326 |
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免反復(fù)凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避光。
有效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試劑盒的有效(xiào)期(qī)一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度下。核酸(suān)擴增部分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一般(bān)要(yào)貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則貯存於2-8℃。盡量避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析(xī)條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設定在(zài)剛好超過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性(xìng)，有明顯的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於等於35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在(zài)一次實(shí)驗中同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本；對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次(cì)，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有指數擴(kuò)增期，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判定為陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙染，試劑(jì)汙染，樣品交叉汙(wū)染會出現假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試劑(jì)運輸，保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確(què)引起的試劑(jì)檢測效能下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會導致出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應的忠(zhōng)實性；
④靶基(jī)因的特異(yì)性與保守性(xìng)。
誌(zhì)賀氏菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)正確(què)結合(hé)是關鍵。引物(wù)與模(mó)板的結合(hé)及引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是(shì)遵循鹼基配對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶合成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高溫(wēn)性，使反應中(zhōng)模(mó)板與引(yǐn)物的(dí)結合(復(fù)性)可以(yǐ)在較高(gāo)的溫度下進(jìn)行(háng)，結合(hé)的特異性大大增加，被擴(kuò)增(zēng)的靶基因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持很(hěn)高的正(zhèng)確度。再通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異性和保守(shǒu)性高的靶基(jī)因(yīn)區，其特異性程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數方式增加的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個細胞中(zhōng)檢出(chū)一個靶細(xì)胞；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位)；在(zài)細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次性(xìng)地將反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進行變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增反應。擴(kuò)增產物一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳分析，不(bù)一定要用同位素，無放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的純(chún)度要求低(dī)
不(bù)需要分(fēn)離(lí)病毒或細(xì)菌(jūn)及(jí)培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為擴增模板。可(kě)直接用臨床標(biāo)本如血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概(gài)論。
